Monografias | Síndrome de Intestino Corto: Modelo animal en ratas

INDICE
Resumen
1.INTRODUCCIÓN 
1.1 Identificación del problema
1.2 Antecedentes y estado actual de la temática 
2.OBJETIVOS
3.DESARROLLO
3.1 Muestra 
3.2 Diseño experimental
3.3 Modelo de Intestino Corto 
3.4 Determinación del peso corporal 
3.5 Estudio del Contenido Total de Proteínas de los órganos.
3.6 Actividad Lactásica Intestinal.
3.7 Estudio histológico de los Cortes de Intestino Delgado.
3.8 Determinación de Variables bioquímicas indicadoras de estado nutricional
4.RESULTADOS Y .DISCUSIÓN
5.CONCLUSIONES 
6.BIBLIOGRAFÍA

RESUMEN
El síndrome de intestino corto es una patología grave, consecuencia de resecciones intestinales extensas secundarias a múltiples etiologías, es la incapacidad del intestino remanente de digerir y absorber los nutrientes dentro de patrones fisiológicos normales, con afectación el estado nutricional. En este trabajo utilizamos un modelo animal del síndrome de intestino corto obtenido por resección intestinal distal (ileon) de un 75% de magnitud, en 40 ratas Wistar macho adulto joven con pesos 295 ± 10 grs,. El estado nutricional fue un indicador indirecto usado para evaluar la reproducibilidad del síndrome, para ello se utilizaron las variables, peso diario del animal, albúmina sérica, creatinina en orina de 24 hrs., colesterol total, contenido de proteínas en órganos, conteo total de linfocitos. La actividad disacaridásica y el estudio histológico de intestino fueron los indicadores directos. La reproducibilidad obtenida de este síndrome con el empleo de un modelo animal constituye una herramienta invaluable para el estudio de dicho síndrome el cual puede ser usado para la evaluación de opciones terapéuticas que contribuyan a elevar la calidad de los pacientes que padezcan dicho síndrome. 

Palabras claves: intestino corto, modelo animal, evaluación nutricional.

INTRODUCCION
1.1 Identificación del problema.
La digestión y absorción de los alimentos y nutrientes respectivamente es un proceso integrado, el cual se puede alterar y conducir a un estado de desnutrición grave. Muchas son las enfermedades que cursan con compromiso del tracto gastrointestinal, entre ellas aparece el síndrome de intestino corto, uno de los cuadros más serios y graves, donde no existe posibilidad de reutilización del tubo digestivo, su origen puede ser primario (congénito) o secundario a resecciones intestinales extensas generadas por múltiples etiologias(1.2), el se define como el conjunto de síntomas y signos caracterizado por pérdida de peso, deshidratación, diarreas, esteatorreas, mala absorción en general de los nutrientes, asociado a hipovolemia, hipocalcemia, hipopotasemia, hipozincemia, hipocupremia, anemia, hiperoxaluria y déficit de ácidos grasos esenciales entre otros(3).

Debido a la variabilidad de la longitud del intestino no existe un criterio unificado acerca de cual debe ser la longitud mínima del intestino para considerarlo un síndrome de intestino corto por lo que los autores(4) al referirse a ello lo expresan en porciento por ejemplo: Mencionan que resecciones superiores al 40% de intestino delgado generalmente resulta en mala absorción aunque puede ser tolerada, cuando la resección es superior al 70% la disfunción es grave convirtiendo al paciente en un individuo incapaz de mantener la nutrición y el metabolismo en condiciones adecuadas de supervivencia, aun así estos términos siguen siendo imprecisos por lo que se acepta como mejor denominación la de síndrome postenterectomia o síndrome de falla intestinal. Antiguamente el porciento de individuos que sobrevivía a grandes resecciones intestinales era muy pequeño, actualmente con la existencia de unidades de cuidados críticos el índice de supervivencia se ha elevado(5) considerablemente, esto provoco la aparición de una categoría de pacientes de muy difícil manejo, pues ellos están incapacitados de cubrir sus requerimientos energéticos y nutricionales por vía enteral debido a la perdida de gran parte de la superficie absortiva, todo esto ha motivado la búsqueda de tratamientos alternativos encaminados a lograr la mayor autonomía posible de estos pacientes desde el punto de vista nutricional, siendo la estimulación de la adaptación intestinal del segmento remanente de intestino delgado una de las estrategias mas prometedoras, por lo que actualmente es motivo de muchas investigaciones en el mundo(6) entero en el que se incluye nuestro país.

La evolución del Síndrome Intestino Corto esta claramente dividido en tres momentos(7) correspondiendo a cada una de las fases postoperatorias después de grandes resecciones de intestino delgado.Fase postoperatoria inmediata(algunas semanas): Ella cubre los dos primeros meses del postoperatorio(8), es el periodo de rescate del paciente en que se resuelven las secuelas sépticas y las complicaciones técnicas de la cirugía por lo cual los pacientes sufren de varios traumas operatorio en corto tiempo, agravando el estado nutricional al estar en ayuna con hipercatabolismo sometido a trauma repetido y múltiple (infecciones y cirugía),además es el momento de resolver el gran desequilibrio hidroelectrolítico y hemodinámico secundario a la diarrea severa, por lo tanto la terapéutica también va dirigida al reemplazo de líquidos y electrolitos, disminución de las secreciones y motilidad intestinal , también se da apoyo con nutrición parenteral total , estrategia que ha elevado considerablemente la sobrevida de los pacientes en esta primera etapa donde fallecían la mayoría de ellos ,al revertirse esta situación los pacientes pasan a dos periodos posteriores donde el manejo se hace mas difícil(9) debido al gran numero de complicaciones, y de interrogantes que existen acerca de la fisiopatología y tratamiento del síndrome.

Fase de adaptación inicial (duración hasta seis meses): Se caracteriza por diarrea rebelde por aumento por aumento de la producción de ácido, por aumento de las secreciones intestinales, diarrea biliar ácida y esteatorrea. Este periodo es considerado una etapa crucial pues de la evolución satisfactoria o no del paciente durante esta etapa dependerá la vida futura del mismo, durante este tiempo se intentara lograr la nutrición del paciente por vía enteral sino de forma completa al menos lograr que esta vía aporte la mayor cantidad de nutrientes posibles, para mantener un trofismo adecuado del intestino mejorando de esta forma la capacidad de respuesta adaptativa del órgano(10). 

Actualmente existen varios protocolos de tratamiento para esta etapa existiendo un gran número de terapéuticas que se están probando con el fin de lograr una mayor y más rápida adaptación intestinal, son procedimientos en controversia y cuyos resultados han sido variables. El hecho de contar con un modelo animal que permita evaluar esta variedad de protocolos terapéuticos constituiría una herramienta valiosa en la búsqueda de la mejor terapéutica para estos pacientes. 

1.2 Antecedentes y estado actual de la temática 
Síndrome de Intestino Corto.

Este síndrome es consecuencia de resecciones intestinales extensas secundarias a múltiples causas(11,12) de ahí que no se presente de forma infrecuente. Estas causas están presentes en todas las etapas de la vida presentándose desde el mismo momento del nacimiento, entre las más frecuentes se citan la agenesia intestinal congénita, trombosis mesentericas, mesenteritis entre otras. La etapa de la vida donde existe una mayor incidencia es la del adulto joven(13) no existiendo diferencia en cuanto a sexo con un promedio de edad de 34 años, entre las patologías que más aparecen en esta etapa de la vida se mencionan la enfermedad de Crohn, trombosis mesenterica, hernias internas con necrosis y volvulo intestinal. No necesariamente una resección intestinal conduce a un síndrome de este tipo, esto esta en dependencia de algunos factores(4 )como son topografía y extensión de la resección, tipo de intestino remanente, estado funcional del intestino remanente, capacidad de adaptación del intestino remanente, estado de la enfermedad primaria y de la terapéutica utilizada.

Desde épocas tan tempranas como el año 1880 ya un médico describía que resecciones amplias de intestino delgado eran técnicamente posibles, no fue hasta principios del siglo XX que muchos pacientes han logrado sobrevivir incluso con ausencia total del intestino delgado, gracias a los avances alcanzados por las ciencias médicas, fenómeno al cual no escapa nuestro país con el desarrollo alcanzado en esta rama. Si bien es cierto que han logrado sobrevivir la gran mayoría de los pacientes que sufren de resecciones intestinales amplias, lo hacen con un marcado deterioro de su calidad de vida pues muchos de los tratamientos utilizados le crean a los pacientes una dependencia muy grande, prácticamente de por vida de las instituciones de salud.Realmente el tratamiento del síndrome se vuelve complejo debido a que es imposible tratar a dos pacientes con la misma terapéutica, la variabilidad de respuesta adaptativa marca la diferencia4 y ella a su vez depende de las condiciones que impusieron la resección. El objetivo fundamental del tratamiento del síndrome es tratar de devolver al paciente a un estado nutricional lo más adecuado posible y de esta forma corregir gran parte del cortejo sintomático que acompañan a dicho síndrome.

Inicialmente apareció la nutrición parenteral con uso total o parcial en dependencia de la gravedad del cuadro, la cual le aporta al paciente todos los nutrientes necesarios para lograr el establecimiento de un estado nutricional mas o menos adecuado, se basa fundamentalmente en el aporte de aminoácidos, ácidos grasos, oligoelementos, glúcidos y vitaminas. Este tipo de terapéutica tiene probados resultados positivos en todo el mundo y actualmente se continua trabajando en la elaboración de nuevas formulaciones que no solo nutran sino que estimulen la mucosa de intestino delgado remanente, pues su utilización se ha asociado con atrofia de la mucosa, la cual se nutre básicamente con los nutrientes que se incorporan por la vía enteral.

Sin embargo esta terapéutica tiene muchas complicaciones(14.15,16) las cuales imposibilitan mantenerla por tiempo indefinido la primera está referida a la vía de administración para la cual se necesita de la canalización de vasos centrales con el elevado riesgo de sepsis que ello implica, rechazo al material del catéter entre otras. Todo esto va limitando el tiempo de utilización de la vía, otros de sus inconvenientes son las condiciones mínimas necesarias e indispensables para poder usar este tipo de nutrición la cual en países desarrollados ha adoptado una modalidad de autoadministración domiciliaria(17) por parte del paciente hecho que no se puede llevar a cabo en nuestro medio ya que este tipo de tratamiento solo se reserva para las instituciones hospitalarias por lo que para recibirlo es necesario el ingreso hospitalario elevando aún más el costo de estos tratamientos considerado en el mundo entero como uno de los tratamientos que mas gastos generan.

Otra modalidad de tratamiento que se utiliza en el mundo es el uso de técnicas quirúrgicas(18,19) que aumenten la capacidad de absorción del intestino como lo es tratar de disminuir el tránsito intestinal y aumentar de esta forma el tiempo de contacto de los alimentos con la mucosa, también existen técnicas encaminadas a aumentar la superficie de absorción siendo el transplante intestinal una de las que más recursos se le ha destinado. En el mundo tan solo se realizan aproximadamente 500 intervenciones de este tipo cada año, primero por la dificultad que esta técnica implica y los costos de tal proceder, el porciento de fracaso es muy elevado y ello lo condiciona las características especificas que tiene este órgano como es que un intestino puede estar colonizado por todo tipo de gérmenes(20) y esto puede acrecentar las posibilidades de rechazo o infección en el receptor, considerando que el intestino es el mayor órgano linfoide del organismo.

Por último existe una tercera estrategia de tratamiento y es la encaminada a lograr la adaptación intestinal(21) máxima del intestino delgado remanente en el menor periodo de tiempo posible. Actualmente en el mundo existe un conocimiento bastante amplio aunque no completo de todos los posibles factores involucrados en la adaptación intestinal, claro está que todos ellos se expresan de forma diferente en los pacientes que padecen de este síndrome pues existen muchas modalidades de resecciones quirúrgicas que son capaces de producir el síndrome y por ende distintas formas de expresarlo tanto desde el punto de vista sintomático como adaptativo.

·Modelos animales del Síndrome de Intestino Corto.

En las investigaciones de este síndrome lo que más se ha utilizado en el mundo es la experimentación con animales diseñando modelos(22,.23) que sean capaces de reproducir este complejo síndrome utilizándose especies como: conejos, currieles, cerdos, perros, ratones y ratas esta última especie muy utilizada debido al corto periodo de tiempo en que logran la adaptación intestinal (aproximadamente 12 días) en comparación con el perro que la alcanza a las 12 semanas,convirtiéndose el modelo experimental en ratas muy viable , la diferencia entre los modelos utilizados(24) radica en el porciento de intestino resecado , el cual debe ser lo suficientemente extenso para que reproduzca el síndrome puesto que estos animales tienen gran capacidad de adaptación , pero teniendo el cuidado que la extensión de la resección no comprometa la vida del animal en muy corto periodo de tiempo .Los porcientos de resecciones más usadas oscilan entre el 70 % y el 85%, los segmentos resecados pueden ser a predominio de yeyuno, de ileon o de iguales proporciones y con presencia o no de válvula ileocecal todo ello depende de lo que el investigador quiera estudiar. En nuestro país existe el antecedente de una técnica de resección intestinal(25) realizada en ratas en el ICBP “Victoria de Girón” en la cual se realizó una enterectomia masiva proximal (resecando yeyuno ) y una distal (resecando íleon) obteniéndose ratas con un marcado deterioro nutricional.

La reproducibilidad de este síndrome por el modelo experimental se confirma por la valoración del peso del animal a lo largo del tiempo, tiempo que fija cada investigador en dependencia de los objetivos trazados en la investigación. También se apoya en la determinación de otras variables como son índice de absorción de glucosa del intestino remanente25, determinación de contenido proteínas de intestino remanente y dosificación de disacaridasas.

OBJETIVOS
General:
- Evaluar la reproducibilidad de un modelo animal del Síndrome de Intestino Corto en ratas.

Específicos:
- Evaluar los efectos de la resección intestinal sobre la evolución del peso de los animales.

- Comprobar que la modificación de las variables morfofuncionales: Actividad disacaridásica del segmento remanente, contenido de proteína del intestino remanente y estudio histológico de esta estructura, constituyen indicadores de la instauración del Síndrome de Intestino Corto. 

- Verificar la aparición de cambios funcionales a nivel del intestino remanente como consecuencia de la adaptación intestinal del mismo.

3. DESARROLLO
3.1 Muestra
En el modelo desarrollado, se siguieron las recomendaciones orientadas para el manejo de los animales de experimentación(26) y en él utilizamos 40 ratas albinas macho adulto joven (ocho semanas de edad) de la raza Wistar con peso de 295 ± 10 g, se escogieron los machos para eliminar el posible efecto modificador que pudiera tener las variaciones hormonales que normalmente ocurren durante el ciclo de vida de las ratas hembras.

3.2 Diseño experimental
Los animales se dividieron en dos grupos, cada grupo se dividió en dos subgrupos (a y b) ellos se agruparon al azar. Estos grupos se clasificaron en control negativo(1), Resección quirúrgica (2) En una primera etapa se trabajo con los subgrupos (a) de cada categoría, a los subgrupos de las categorías (2) se les realizó una resección distal de intestino delgado de un 75% del total de su extensión, al subgrupo a se evoluciono durante siete días que dura esta etapa registrándose su peso diario, el otro subgrupo se procedió de la misma forma solo que fue evolucionado durante catorces días. Al primer grupo (1) a y b se les mantuvo en las mismas condiciones de alimentación y cuidado que a los otros pero no se les realizo resección alguna sacrificándose junto a los otros grupos al final de cada etapa donde se determinaron una serie de variables que evaluaron su estado nutricional. En una segunda etapa se trabajo con el subgrupo, 2 b, de animales, procediéndose de la misma forma con la diferencia que esta etapa se evaluó el grado de adaptación intestinal de los mismos utilizando las mismas variables. 

3.3 Modelo de Intestino Corto 
Se comenzó pesando a los animales y el peso tomado se designo como peso del día cero y fue registrado diariamente mientras duró la experiencia, esta determinación siempre se realizó a la misma hora y con el mismo instrumento, este proceder se describirá con detalles al comentar como se determinaron las variables estudiadas. Una vez obtenido el peso del animal se procedió a calcular la dosis del anestésico usado, Pentobarbital Sódico: dosis de 40 mg x Kg de peso, el ampula de este anestésico tiene una presentación de 250 mg en 2 ml, se disuelve en 23 ml de suero fisiológico llevándose a una dilución de 10 mg por ml o lo que es lo mismo 1 mg por cada décima haciéndose más fácil la forma de calcular la dosis. Una vez anestesiado se inmovilizó el animal y se rasuró el abdomen, se limpió la zona con un antiséptico y se hizo una incisión en la línea media abdominal abriéndose por planos hasta llegar a la cavidad peritoneal, se colocaron los separadores y se procedió a la identificación de las estructuras intrabdominales, se localizo la unión del ileon al colon (válvula iliocecal) tomándose como punto de referencia, a partir del cual se midió el intestino delgado, para realizar este paso se tomó hilo de sutura de seda y se fué extrayendo poco a poco el intestino de la cavidad, paralelo al órgano se colocó el hilo de sutura para conocer la longitud del intestino, esta medición se realizó hasta el asa fija o ángulo de Treiz, (lugar donde termina el duodeno y comienza el yeyuno aproximadamente), una vez conocida esta longitud (variable de un animal a otro) el hilo se dividió en cuatro partes iguales representando cada parte un 25% de la longitud total del intestino delgado, se tomó una de estas partes, la cual se usó como patrón de referencia para medir el segmento de intestino que se le dejaba al animal, este segmento de intestino se midió del ángulo de Treiz hacia delante garantizando de esta forma que la resección fuera distal a predominio de ileon y de una magnitud de 75%.Una vez identificado el segmento a resecar se procedió a ligar los vasos sanguíneos con catgut simple garantizando una homeostasis adecuada, al seccionar el intestino se realizó anastomosis termino – terminal de los dos cabos donde se utilizó sutura 6/0, todo el tiempo se mantuvieron los órganos cubiertos con apósitos embebidos en suero fisiológico para evitar su daño por deshidratación, al terminar la anastomosis se introdujeron los órganos nuevamente en la cavidad peritoneal y se le instilaron 5 ml de suero fisiológico en la cavidad para evitar la deshidratación por las perdidas de líquidos que se produjeron durante el proceder quirúrgico, seguidamente se procedió al cierre de la misma por planos utilizándose catgut crómico para los planos interiores y seda para la piel. Se limpio bien la herida con una solución antiséptica y se colocaron las ratas en jaulas separadas, las primeras doce horas posteriores a la operación solo se le administro agua, pasado este tiempo se le permitió el acceso a la comida habitual (ratonina) la cual se administro “ad libitum”. Este proceder se realizo de la misma forma con cada uno de los animales hasta el final de experiencia.

Obtención del material biológico: Después de terminada la experiencia se obtuvo muestras de sangre y de órganos para la determinación de variables bioquímicas y morfofuncionales que evaluaron el estado nutricional y el grado de adaptación intestinal de los animales. En ninguno de estos procederes el animal sufrió dolor alguno, primeramente fueron sacrificados por inhalación de éter en cámara creada “ad hoc”, luego se procedió a abrir cavidad torácica donde se extrajo la sangre por punción cardiaca obteniéndose entre 7 y 8 ml de sangre muestra suficiente para la determinación de todas las variables bioquímicas estudiadas. Seguidamente se extrajeron los siguientes órganos: corazón, estomago, segmento remanente de intestino delgado, riñón, hígado y una muestra de músculo que se tomo del músculo gastronemio. 

3.4 Determinación del peso corporal 
El peso se determinó en una balanza de mesa de dos platos (Mettler H31AR) previamente calibrada, la determinación fué hecha diariamente mientras duró la experiencia, a la misma hora, por el mismo investigador puesto que este indicador es considerado uno de los mas sensibles en la evaluación del estado nutricional, los datos fueron recogidos en modelos en modelos confeccionados para tales efectos.

3.5 Estudio del Contenido Total de Proteínas de los órganos.
Teniendo en cuenta que la concentración de proteínas refleja el estado morfofuncional de los órganos, comenzamos valorando la concentración en intestino delgado remanente esta determinación es considerada como un índice de la masa celular funcional de la mucosa intestinal, una vez obtenido el material biológico como ya explicamos anteriormente se tomó un segmento de 10 cm de intestino remanente obteniéndose del mismo por raspado 300 mg de mucosa pesados en balanza analítica (Sartorius) el material fue homogeneizado en 2 ml de NaOH 0.1 N y se cuantificó el contenido de proteínas según el método de Lowry(27), de igual forma se procedió para determinar la concentración en los restantes órganos con la diferencia de que el homogeneizado se realizó pesando 300 mg del órgano como tal, siguiendo luego la misma metodología. 

3.6 Actividad Lactásica Intestinal.
El segmento de intestino delgado extraído (primera parte del yeyuno), fué lavado con solución de cloruro de sodio 0.15 N y se procedió a su apertura en sentido longitudinal y luego se lavó suavemente en la misma solución. A continuación se obtuvieron por raspado 110 mg de mucosa, pesada en balanza analítica (Sarorius), y se le añadió 2 ml de suero fisiológico frío, homogeneizándose en un dispositivo tipo Potter a 100 r.p.m. durante 3 minutos a temperatura de equilibrio hielo-agua. A continuación se centrifugó durante 5 minutos a 3000 r.p.m. (centrífuga Hitachi), tomando posteriormente el sobrenadante.

Se tomaron 200 ml del sobrenadante y se le añadieron 100 ml del disacárido (solución de lactosa 50 mg/ml). Los tubos fueron incubados en baño de María (Termostato Gallenkamp) con agitación a 37 ºC, transcurridos 60 minutos se detuvo la reacción por inmersión de los tubos en agua hirviendo. Se cuantificó la cantidad de glucosa liberada mediante el método de la Glucosa Oxidasa(28), que consiste en la adición de 4 ml del reactivo Rapi Gluco Test a 40 ml de muestra, incubación 1 hora a 37ºC y lectura a 505 nm en un espectrofómetro de la Pharmacia VS-800. Se confeccionó la correspondiente curva estándar utilizando glucosa purificada para el cálculo de la cantidad de glucosa liberada como producto de esta reacción.

3.7 Estudio histológico de los Cortes de Intestino Delgado.
Con el propósito de evaluar los cambios morfológicos que ocurren en el intestino de ratas con síndrome de intestino corto y su adaptación luego de ser tratadas con Factor de Crecimiento Epidérmico o no, tomamos una muestra de intestino delgado remanente de cada animal que integraban los diferentes grupos experimentales. Las muestras fueron colocadas en frascos que contenían formol al 12% y fueron enviadas al Laboratorio de Histología de nuestro Instituto. El estudio fue realizado por un especialista en Histología, quien empleó la técnica de Hematoxilina-Eosina.

3.8 Determinación de Variables bioquímicas indicadoras de estado nutricional
Al concluir cada una de las etapas investigativas se les realizó extracción de sangre a cada uno de los animales por punción cardíaca tal como describimos en la recolección de muestras biológicas. La sangre extraída se uso para el estudio de indicadores bioquímicos del estado nutricional que permiten evaluar el grado de recuperación nutricional que se logro o no en los animales tras la administración del F.C.E. Estos indicadores son: la albúmina sérica principal proteína plasmática, la determinación de las proteínas totales, el colesterol como reserva de grasas del organismo, el conteo de linfocitos totales, pues se plantea que el intestino desempeña un papel importante tanto en la inmunidad específica como inespecífica(29). Además se les realizó creatinina en suero que no es un parámetro indicador de estado nutricional pero nos evalúa el estado de funcionamiento renal para no falsear el resultado de la creatinina excretada en 24 horas en orina que si indica el estado del compartimento muscular, para esto se colocan los animales en jaulas metabólicas 24 horas antes de ser sacrificados para recoger la orina de 24 horas.

Las técnicas empleadas se describen en las bibliografías referidas a continuación.
- Determinación de Albúmina sérica: Por técnica del verde bromocresol(30)
- Determinación de las Proteínas totales: Se realiza por método de Biuret(31)
- Determinación de Colesterol: Se realiza por realiza por método colorimétrico (32)
- Conteo global de leucocitos: Se realiza por conteo de leucocitos por campo(33).
- Determinación de la creatinina excretada en 24 horas: Se realiza por método colorimétrico de Jaffé(34)

4. RESULTADOS Y DISCUSION
El organismo debe verse como un sistema integral al que ingresan nutrimentos (ingestión) y del cual salen los productos no útiles del metabolismo (excreción o gasto), para lograr este objetivo es necesario mantener la integridad de aquellas estructuras que constituyen piezas claves en el normal desarrollo de este proceso, sin lugar a dudas uno de estos elementos principales lo constituye el sistema gastrointestinal puesto que de el depende principalmente la incorporación de los nutrimentos al organismo que vienen contenidos en los alimentos que ingerimos, cualquier alteración en los procesos de secreción, digestión, absorción o motilidad tiene un impacto negativo en la asimilación de los nutrientes, tal es la situación que se presenta en los individuos con síndrome de intestino corto donde básicamente existe una disminución considerable del área de superficie absortiva, provocando alteraciones a nivel de todos los procesos que garantizan el ingreso de los nutrimentos al organismo. 

Normalmente debe existir un balance entre el ingreso y el gasto de nutrientes, donde el primero pueden variar desde cero hasta un límite máximo, mientras que el gasto es continuo, se incrementa en situaciones especificas y nunca tiene un valor de cero, es por ello que cuando los gastos superan los ingresos se establece lo que se conoce como balance negativo, lo cual se traduce en la disminución en el organismo del contenido del nutriente que se esta consumiendo y por ende de la forma en que se almacena en los diferentes compartimentos (muscular, visceral y graso), es mediante el uso de la evaluación nutricional que podemos conocer a nivel orgánico(al menos) el estado de la composición corporal mediante la determinación de variables antropométricas como lo es el peso corporal y variables bioquímicas, es por ello que nuestro estudio lo iniciamos con el análisis del peso corporal como se ilustra en el Gráfico 1.


Gráfico 1 Variaciones promedio en el peso corporal de los animales en los diferentes grupos experimentales(n=20) por días de evolución. Control-(control sano), (Resección quirúrgica intestinal 75% )

Como se puede ver en el gráfico (1) la curva de peso, comenzó a descender en el grupo 2 hasta alrededor de los días 5-6 aproximadamente momento en que se detiene la caída del peso corporal en dicho grupo, estabilizándose primero y comenzando luego una franca recuperación aunque no llega a alcanzar el peso prequirúrgico en el periodo de tiempo estudiado, existe una diferencia significativa el peso de ambos grupos, esto evidencia que el aporte calórico esta muy por debajo de los requerimientos lo que impide mantener el peso corporal de los animales del segundo grupo debido a la reducción de la superficie absortiva. 

Evaluación bioquímica del estado nutricional
Con el fin de conocer la afectación del estado nutricional del grupo de animales a los que se les realizó la resección quirúrgica y como repercutió en los mismos la instauración del síndrome, se determinaron una serie de variables bioquímicas que están descritas como indicadores que evalúan el estado nutricional: albúmina sérica, colesterol y creatinina excretada en orina de 24 horas. 

En el siguiente gráfico mostramos como se comportó representa los niveles de colesterol en sangre, decidimos incorporar esta determinación a pesar de no ser un indicador muy especifico del estado nutricional puesto que nos ofrece información aproximada de cómo se encuentra el compartimento graso, el cual representa una de las mayores fuente de reserva energética del organismo, considerando que durante la desnutrición energética nutrimental sea cual sea su causa el organismo apela a la utilización de sus reservas energéticas para poder realizar sus funciones metabólicas, lo que trae consigo una disminución del compartimento graso. 



Gráfico 2: Valores promedio de colesterol en grupos control sano y grupos con resección intestinal del 75% en determinaciones hechas en el día 7 y 14 de la experiencia. Letras diferentes indican diferencias significativas p < 0.05

Podemos apreciar que en la evaluación hecha en la primera semana de evolución los dos grupos se comportaron de manera similar, es decir el colesterol se mantuvo dentro de rangos normales sin diferencias significativas entre ellos. Ya en la evaluación realizada el día catorce los valores de colesterol cayo en el grupo operado con una disminución significativa , esto nos da una medida de cómo se ha movilizado las reservas del compartimento graso, para garantizar el aporte energético necesario en la actividad metabólica.

Con el objetivo de evaluar el compartimento muscular esquelético o el llamado tejido metabólicamente activo se dosificaron las concentraciones de creatinina excretada en orina de 24 horas en virtud de que la creatinina se origina por hidrólisis no enzimática de la creatina , y de que el 98% de este compuesto se encuentra en el músculo esquelético, entonces la medición de la creatinina excretada en una colección de orina de 24 horas puede servir para hacer inferencias sobre el tamaño del compartimento muscular esquelético .




Gráfico 3: Valores promedio de creatinina excretada en orina de 24 horas en grupos control sano y grupos con resección intestinal del 75 (n=20) en determinaciones hechas en el día 7 y 14 de la experiencia. Letras diferentes indican diferencias significativas p < 0.05.

La excreción de creatinina en orina de 24 horas disminuyo significativamente (p<0.05) en los grupos operados y evolucionados hasta el séptimo día con respecto al grupo control, ya en el día catorce los valores de excreción de creatinina en el grupo con resección quirúrgica se mantuvieron en niveles significativamente inferiores que el grupo control sano. 

Indicadores inmunológicos
Existen evidencias considerables para asegurar el hecho de que la mala nutrición tiene un efecto deletéreo en la inmunocompetencia. Es bien conocido que la mala nutrición energética – proteica se asocia con un incremento en la frecuencia y gravedad de las infecciones, las cuales son las responsables de la elevada morbilidad y mortalidad asociada con esta. De hecho, la mala nutrición se reconoce como la causa más común de inmunodeficiencia secundaria. Numerosos estudios que investigaron los efectos de la deficiencia nutrimental en el sistema inmune del huésped revelan que la desnutrición energética – proteica está asociada invariablemente con una inmunocompetencia sub-normal; incluso para los estados marginales, la inmunocompetencia evaluada mediante un panel de respuestas puede servir como indicador sensible y útil del estado nutricional.

La naturaleza exacta de la interacción entre la nutrición y los mecanismos de defensa del huésped no son totalmente claras, no obstante, este campo es cada vez más explorado, por lo que algunas pruebas inmunológicas novedosas prometen servir como patrones confiables de evaluación nutricional en el futuro. Los indicadores inmunológicos no específicos de mala nutrición energética – proteica son empleados con frecuencia en la evaluación nutricional clínica: el conteo global de linfocitos circulantes y las pruebas de sensibilidad cutánea retardada a determinados antígenos.

A continuación mostramos como se comportó el conteo de linfocitos en los grupos estudiados.



Gráfico 5: Valores promedio del conteo total de linfocitos en grupos control sano y grupos con resección intestinal del 75% (n=20) en determinaciones hechas en el día 7 y 14 de la experiencia. 

En este gráfico se aprecia una caída del conteo total de linfocitos en el grupo que se le realizo resección intestinal, esta disminución se hace más importante en el grupo evolucionado hasta el día siete aunque la diferencia no es significativa con respecto a los grupos control, ya en la determinación del día catorce existe una recuperación del conteo aunque no alcanza los valores normales considerados cuando el conteo es igual o superior a 1500 células por milímetro cúbico. 

Indicadores del estado morfofuncional del intestino
Para evaluar este indicador se hicieron determinaciones de la actividad enzimática del intestino remanente pues la misma nos brinda información acerca de la capacidad funcional del órgano las enzimas que se cuantificaron fueron las disacaridasas (lactasa y maltasa ) y su comportamiento fue el siguiente:


Gráfico 5: Valores promedio de concentración de enzimas disacaridasas en grupos control sano y grupos con resección intestinal del 75% (n=20) en determinaciones hechas en el día 7 de la experiencia. 

En este gráfico podemos observar que se produjo una ligera disminución de la actividad lactásica en el grupo con resección intestinal aunque esta diferencia no fue significativa con respecto a los controles pues en esta etapa de la vida de los animales ya los niveles de concentración de la enzima son bajos si lo comparamos con las ratas neonatas. La maltasa tuvo un comportamiento similar.

Gráfico 6: Valores promedio de concentración de enzimas disacaridasas en grupos control sano y grupos con resección intestinal del 75% (n=20) en determinaciones hechas en el día 14 de la experiencia. 

Las determinaciones realizadas el día catorce mostraron una ligera variación de las concentraciones de las enzimas en el grupo con resección intestinal con respecto a los valores hallados en el día siete de la investigación, no se encontraron diferencias significativas con respecto a los controles. Como parte de la evaluación del estado funcional del intestino se determinó su concentración de proteínas en los dos momentos en que se dividió la investigación.



Gráfico 7: Valores promedio de concentración de proteínas en órganos en grupos control sano y grupos (n=20) con resección intestinal del 75% en determinaciones hechas en los dias 7 y 14 de la experiencia, 

Finalmente se realizó una determinación del contenido de proteínas de varios órganos con el fin de evaluar como repercutió en el compartimento visceral la disminución del aporte energético que se produce al instalarse un síndrome de intestino corto.


Gráfico 10: Valores promedio de concentración de proteínas en órganos en grupos control sano y grupos(n=8) con resección intestinal del 75% tratados y no tratados con factor de crecimiento epidérmico en determinaciones hechas al final de la experiencia, letras diferentes indican diferencia significativa p<0.05

Como se puede apreciar solo hubo variación en el componente de músculo esquelético con disminución importante de este compartimento en el grupo de animales que se le realizo la resección quirurgica de un 75 %.

Estudio Histológico del segmento de Intestino Remanente
El estudio histológico se realizó con el objetivo de estudiar los cambios morfológicos que se producen durante el proceso de adaptación intestinal .


Figura 1 Grupo control    . Microfotografía de un corte transversal de yeyuno.(coloración de Hematoxilina-Eosina)aumento del  numero  de  vellosidades,     vellosidad    larga  y estrecha. 145 X

Figura 2 Grupo que se realizo resección intestinal de 75% Microfotografía de un corte transversal de yeyuno realizado  a los siete días de evolución. Coloración de Hematoxilina-Eosina. Las vellosidades muestran un epitelio menos alto, existe una menor celularidad. 145 X

Figura 3: Grupo que se realizo resección intestinal de 75% evolucionado por catorce días. Microfotografía de un corte transversal de la primera porción del yeyuno. Coloración de Hematoxilina-Eosina Se observa ensanchamiento ligero de las vellosidades sin gran aumento de su numero, existe ligera elongación de las

5. CONCLUSIONES
1. La variación del peso corporal en los animales sometidos a la resección quirúrgica demostró la instauración del SIC puesto que esta variable es la primera que se modifica en dicho síndrome.
2. El deterioro del estado nutricional corroborado por las variables bioquímicas determinadas avalan que este modelo animal reproduce el síndrome de intestino corto.
3. Aunque todos los organismos tienen capacidad adaptativa la adaptación espontánea que se produce tras la instauración de SIC no es capaz de corregir las deficiencias nutricionales.

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AUTORES
Dr. Esmir Camps Calzadilla. Profesor instructor . Especialista en Fisiologia Normal y Patológica.
Lic. Mailin Borroto Castellano. Profesor instructor . Residente de Fisiologia Normal y Patológica.

Institución: Laboratorio de Fisiología Digestiva Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas “Victoria de Girón”. 
Instituto Superior de Ciencias Médicas de la Habana. Cuba.
Siglas: ICBP “Victoria de Girón”
Organismo: Ministerio de Salud Pública 
Dirección: Calle 146 y Esq. 31 No 3102, Reparto Cubanacán, Playa 
Teléfono: 2719498.
Email: esmir.camps@infomed.sld.cu

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