|
Categorias
|
Colas animales
Índice1. Colágeno 2. Gelatina 3. Anexo 1.Propiedades del colágeno 6. Anexo 2.Aspectos básicos sobre adhesivos 7. Condiciones generales para una buena adhesión 8. Bibliografía
COLAGENO Proteínas fibrosas: Es uno de los tipos de proteínas más abundantes, una que pertenece a este tipo es el colágeno, que constituye un tercio de las proteínas de los vertebrados, está formada por una cadena de tres polipéptidos que a su vez se compone de 1000 aminoácidos unidos por enlaces de hidrógeno, formando una espiral muy apretada las moléculas se empaquetan en fibrillas, yestas a su vez en fibras mayor tamaño. Las cadenas tienen como uno de los aminoácidos abundantes la glicina y también la prolina. La glicina se sitúa en uno de cadatres aminoácidos, aparece en los tendones, las moléculas adyacentes de colágeno se unen por enlaces covalentes que se sitúan de forma cruzada entre los aminoácidos vecinos y la lisina. En un vertebrado, el colágeno forma parte de los tendones que unen los músculos al hueso, están formados por hazes paralelos de fibras de colágeno muy resistentes y que no se estiran. Otras estructuras, en cambio como el cuero, se forman por fibrillas de colágeno que originan una red de láminas imbricadas unas con otras. La cornea es una cubierta transparente formada por colágeno. Cuando el colágeno se hierve en agua, los polímeros se dispersan, dando lugar a cadenas más cortas originando así la gelatina. Otras proteinas fibrosas son la queratina, la seda y la elastina. La elastina se encuentra en el tejido elástico de los ligamentos, y forma parte de laestructura de las arterias y los pulmones. pro-gli-aa.-pro-gli-aa.-hipro(hidroxiprolina)-gli-pro-lupro-gli-
En la triple hélice cada cadena está espiralizada en sentido antihorario, pero el conjunto de las tres cadenas espiraliza en sentido horario:
La elasticidad de la elastina se debe a la capacidad de lasmoléculas para desenrrollarse de forma reversible, esta proteina se sintetizaen las células del tejido y se segrega a la matriz extracelular.
EFICACIA DEL COLÁGENO El término colágeno (del griero kola, que significacola, y egonomen, equivalente a producir) anteriormente sólo empleado en lasesferas científicas especializadas, ahora es ya utilizado a nivel del gran público.Por consiguiente, es conveniente conocer bien esta proteína a fin de tener unaclara idea de sus particularidades y posibilidades de aplicación. Hasta lafecha, se han publicado numerosos estudios sobre el colágeno, pero losrelativos a precisar sobre su participación en los mecanismos delenvejecimiento han sido, ciertamente, los de mayor importancia para lasinvestigaciones que se vienen acometiendo en el campo cosmético. La modificaciónde la estructura del colágeno en el transcurso del envejecimiento semanifiesta a nivel cutáneo por una pérdida de elasticidad, un menorhinchamiento de las capas subyacentes, lo que conduce al aspecto flácido yrugoso de las pieles ancianas. Esta constatación viene además acompañada deotras propiedades reveladas por los estudios fundamentales realizados sobre el colágeno.Su labilidad y el papel que desempeña en los fenómenos inflamatorios, porejemplo, lo sitúan en primera línea de las sustancias biológicas disponibles.
EL COLÁGENO SOLUBLE Y SU OBTENCIÓN El colágeno, en forma de fibras insolubles o agregados fibrosos, es la proteína constituyente principal de las capas intercelulares o tejidosconjuntivos fibrosos, los cuales son los mayores elementos estructurales en laanatomía de los vertebrados. Como ocurre con la proteína, el colágeno también se halla presente en abundancia en otras partes de los seres vivientes. Se sabe con certeza que el colágeno comprende entre el 30 y el 60% delcontenido de proteína total de los mamíferos, y más del 30% del contenidototal de la materia orgánica. Las localizaciones primarias de la proteína sonen la piel, los huesos y los tendones, y en base seca, el lecho del corium de lapiel (por ejemplo en la dermis), se halla constituido por un 90 a 95% de colágeno.No obstante, las fibras colágenas no se hallan exclusivamente confinadas en dichas regiones, sino que también puede ser encontrado en cada tejido y órgano viviente. El tejido conjuntivo fue ya tratado con ácidos diluidos en1872 durante unas investigaciones histológicas, pero fue quizás Zachariadasquién primero notó, en 1900 que los tendones hinchados en soluciones de ácidosdiluidos llegaban a ser homogéneos, indicando que alguna sustancia habíaentrado en solución. Previamente, había afirmado que todo el colágenoera insoluble. Sin embargo, dicho fenómeno no se investigó hasta 1930 y fue enFrancia donde, con técnicas más avanzadas, se demostró que las soluciones de colágenoen ácido acético diluido podían ser precipitadas bajo ciertas condiciones. Posteriormente, en Rusia, se demostró que los extractos de colágenoen soluciones de citrato ácido contenían una proteína natural, pudiendo serreconstituida por diálisis para dar colágeno fibroso. Orekhovitch demostró que el colágeno soluble podíaser obtenido por extracción con amortiguadores de citrato ácido, desde un Ph 3a un PH 4,5 a partir de cualquier colágeno y, en particular, en grandescantidades a partir de animales jóvenes. A esta materia le aplicó ladenominación de procolágeno, queriendo con ello expresar la creencia de que elcolágeno ácido-soluble era el precursor biológico del fibroso o colágenoinsoluble. Comercialmente, el colágeno soluble se obtiene de lostejidos conjuntivos por extracción mediante amortiguadores ácidos o porsolubilización en el decurso del procesos alcalinos o enzimáticos. Los métodosde producción de colágeno ácido soluble se hallan basados en tónicasdesarrolladas a fines investigativos, pero omitiendo de éstas algunas etapaspurificativas y acentuando el carácter ácido de la operación, se logranniveles de producción muy aceptables.
PROPIEDADES GENERALES El colágeno nativo posee propiedades muy particularesque no se encuentran en los productos de degradación, es decir, en la gelatina. La reactividad bioquímica del colágeno nativoproviene, sustancialmente, de los telopéptidos de las extremidades de la cadenapolipeptídica, ello de una parte y, de otra, de su propia estructura. Las películas preparadas a partir de soluciones de colágenonativo son muy resistentes. Las soluciones de gelatina por evaporación, tienden, engeneral, a la pulverización y algunas veces proporcionan películas muy frágiles. Las películas de colágeno nativo se adhierenfuertemente a las capas queratinizadas de la hepidermis humana y poseen unimportante poder de retención de agua. El colágeno nativo extendido sobre la piel posee unaspecto de alisamiento sobre las pieles secas, disminuyendo el aspecto arrugadoy exfoliado de las pieles ancianas.
FORMULACIÓN Las soluciones de colágeno nativo pueden adicionarsea las dispersiones emulsiones cosméticas iónicas acidas o no iónicas, endosis comprendidas entre el 5 y el 10%.
INCOMPATIBILIDADES El colágeno soluble es incompatible con el. calor, laluz, los taninos y a Ph muy alcalino
FORMACION DEL COLAGENO Fase intra-fibroblástica A partir de la estructura de Pro-colágeno, se forman todoslos tipos de colágeno. Fase extra-fibroblástica En la salida del fibroblasto las moléculas de pro-colágenosufren la acción de dos proteasas cuyo cofactor es el calcio, que rompen losenlaces de los péptidos de extensión:
En las extremidades de la molécula se encuentran unassecuencias polipeptídicas amorfas llamadas telopéptidos. Las moléculas de tropo-colágeno se organizan de formaespontánea mediante enlaces electrostáticos de hidrógeno e hidrófobos paraformar microfibrillas. La estabilidad del primer sistema es débil y suestructura es aún reversible. En este estadio podemos hablar de colágeno nativo neutro-soluble, pues es posible solubilizar la molécula en una soluciónsalina a pH neutro.
Maduración A nivel de los telopéptidos se establecen enlaces covalentesentre las dos cadenas polipeptídicas: AMINOPROPEPTIDO CARBOXIPROPEPTIDO
a) Dominio compacto; b) Triple hélice corta (10-12 mm); c)Telopéptido; d) Dominio globular. - los puentes intramoleculares de tipo aldol unen las cadenasa de una misma molécula. - los enlaces covalentes intermoleculares forman las fibrasde colágeno. El proceso de maduración conduce a la reticulación del colágeno,provocando la insolubilización de las fibras. Es el denominado colágenonativo fibroso soluble .Así en el organismo podemos encontrar simultáneamente: - colágeno nativo neutro-soluble - colágeno ácido-soluble (en vías de reticulación). - colágeno nativo fibroso insoluble En base a estas diferentes solubilidades se clasifican loscolágenos usados como materias primas en la fabricación de productos dérmicos.
TIPOS DE COLAGENO Se han descrito diferentes tipos de colágeno genéticamentedistintos, los cuales se pueden clasificar en tres grupos atendiendo a sudescripción bioquímica y morfológica:
COLAGENOS MAYORES Colágeno tipo I Formado por la asociación en triple hélice de dos cadenaspolipeptídicas idénticas y de una cadena genéticamente distinta (a 1 I)2 y a2 I. Su organización supramolecular es de fibrillas. Se encuentraen todos los tejidos conjuntivos y es totalitario a nivel del hueso y dentina. Colágeno tipo II Formado por asociación en triple hélice de tres cadenaspolipeptídicas idénticas (a 1 II)3. Posee organización supramolecular en finas fibrillas. Seencuentra a nivel de cartílagos y del humor vítreo ocular. Colágeno tipo III Formado por la asociación en triple hélice de cadenaspolipeptídicas idénticas (a 1 III)3. Este colágeno posee residuos de cisteínas quepermiten la formación de puentes disulfuro en el seno de la hélice. Suorganización supramolecular es de finas fibrillas formando una fina redreticular. Este colágeno asociado al colágeno de tipo I seencuentra en la mayor parte del tejido conjuntivo. Colágeno tipo IV Formado por dos cadenas polipeptídicas diferentes a 1 IV y a2 IV cuya composición molecular aún no está esclarecida. Posee zonas colagénicas y zonas no colagénicas, pues subaja cantidad de glicina proporciona zonas no organizadas a nivel de la porciónhelicoidal. Este colágeno se encuentra en las membranas basales. Colágeno tipo V Formado por tres cadenas polipeptídicas a 1 V, a 2 V, a 3 V.La composición molecular de la cadena a V está aún por definir. Posee extremidades de estructura no colagénica que permitenasociaciones muy estables. Se encuentra en la zona pericelular y en asociación con lasfibras de colágeno intersticial.
LOS NUEVOS COLAGENOS Colágeno embrionario de tipo I trímero Formado por tres cadenas a I. Colágeno tipo VI "intima colágeno" Formado por tres cadenas polipeptídicas diferentes" cadenas cortas", a 1 (VI) o SC1, a 2 (VI) o SC 2 y a 3 (VI) o SC3. Se encuentran formando una triple hélice de pequeña longitud. Colágeno tipo VII "LC colágeno" Formado por tres cadenas polipeptídicas LC (long chains). Se encuentran formando una triple hélice de larga longitud. Colágeno tipo VIII o "colágeno endotelial" Formando por tres cadenas proteicas EC1, EC2, EC y por secuencias no colagénicas.
COLAGENOS MENORES DEL CARTILAGO Colágeno tipo IX Formado por dos fragmentos: HMW y LMW. El HMW (high molecularweight) está compuesto por tres cadenas diferentes que presentan puentes disulfuro intercatenario en el centro del fragmento. El LMW(low molecular weight) igualmente posee tres cadenas diferentes con puentesdisulfuro. Colágeno tipo X Posee una parte globular no colagénica en un extremo de lamolécula. No posee puentes disulfuro. Este colágeno parece que sólo sesintetiza durante la formación del cartílago o en el interior de los geles de colágeno. Nos centraremos en la descripción del colágeno tipoI, por ser el de mayor proporción en los vertebrados. Rich y Crick en 1955 (7), definieron su estructura: tres cadenas polipeptídicas a en forma de hélices desentido izquierdo cuyos ejes se enrrollan en una super hélice de sentidoderecho alrededor de un eje común. La molécula de colágeno se presentacomo un bastón de 300 nm de longitud y 15 A de diámetro. Contiene 1050 aminoácidos.La secuencia glucina- prolina- hydroxiprolina es repetitiva y juega un papelimportante en la estabilidad de la molécula. Existen hidratos de carbono(unidades mono y disacáridos galactosa y galactosa-glucosa) que intervienen enel proceso de reticulación. La rigidez de la triple hélice se debe a los enlaces de hidrógenoque se forman entre los grupos peptídicos, en los cuales pueden intervenir deforma eventual moléculas de agua e interacciones hidrófobas de Vander Waals. La presencia de fracciones pirrolidino de la prolina y lahidroxiprolina, contribuye a la estabilidad térmica relativa de la molécula.En las extremidades de la triple hélice, existen dos partes amorfas: los telopéptidos,cuyas cadenas son pobres en glicina y prolina, y bastante ricas en tirosina. Noposeen estructura helicoidal. Su papel es importante en la maduración del colágenopues es en este nivel donde se establecen los enlaces transversales covalentes.Finalmente existen los péptidos terminales N y C que son los péptidosformadores de la triple hélice y que son extirpados durante la excreción fueradel fibroblasto durante la síntesis colagénica. - Morfología: El tejido conjuntivo está formado de haces de fibras dediferentes tamaños (desde micras hasta centímetros) según la especie. Cadafibra está constituida por la asociación de varias fibrillas. Esta estructuraperiódica se explica por la ordenación de una rejilla de moléculas de colágeno.Las fibrillas de este enrejado están desplazadas en un cuarto de su longitud. -Degradación: El colágeno se degrada, en condiciones fisiológicas,por enzimas específicos (colagenasas, proteasas neutras y catepsinaslisosomiales). Las colagenasas, principales enzimas de degradación, son unosmetaloenzimas que precisan la presencia de dos cofactores: calcio y zinc. Lacolagenasa produce una rotura en un punto específico de cada cadena de colágeno: - un fragmento N-terminal (3/4 de la molécula) - un fragmento C-terminal (1/4 de la molécula) Esta hendidura comporta la pérdida de conformación de latriple hélice, liberando las cadenas nativas y facilitando el ataque por losenzimas proteolíticos específicos. Según Light y Bailes, el número deenlaces cruzados reducibles, disminuye con el paso del tiempo y se vanreemplazando por enlaces estables, lo que proporciona cambios químicos y físicos(disminuye la solubilidad, la susceptibilidad a los enzimas, retención de aguay resistencia a mecánica).
COLAGENOS COMERCIALES El colágeno comercial puede presentarse de diferentesformas, sólido o líquido, representativas de distintos estados estructuralesde la molécula en los tejidos conjuntivos y de las transformaciones que sufredesde su extracción y su preparación como materia prima. El colágeno se extrae industrialmente de la dermis yde tendones de bóvidos y del cerdo. Otra fuente es a partir de la placentahumana. Ultimamente, se ha obtenido una proteína colagénica del tejidoconjuntivo de peces con esqueleto óseo (teleostenos). Se distinguen: Colágeno nativo: colágeno que no ha sufrido ninguna modificación desu estructura inicial; así pues posee íntegramente sus cadenas polipeptídicasy sus telopéptidos. Puede ser soluble o insoluble. · colágeno nativo neutro-soluble: es aquel que puede ser solubilizado con una solución salina a pH neutro. Se corresponde al estado en que la estructura fibrilar es aún frágil y reversible. Existe en muy poca proporción, por lo que no se extrae normalmente para usos industriales.
Colágeno desreticulado: La extracción se realiza por tratamiento enzimático. Losenzimas rompen los telopéptidos de la molécula de colágeno permitiendoliberar la zona de triple hélice. La integridad de la estructura triple helicoidal se mantieney la solubilidad de la molécula aumenta. Se pueden encontrar soluciones acuosasdel 3% de colágeno desreticulado, mientras que sólo existen de 0,5% máximopara el colágeno nativo soluble.
Colágeno desnaturalizado: Existen métodos extractivos basados en el uso de agentesdesnaturantes, que permiten obtener un colágeno cuya estructurahelicoidal está más o menos destruida. Estamos ya en la denominación deGelatina.
Colágeno degradado: La degradación corresponde a la rotura de las cadenas a. Secaracteriza por poseer cadenas peptídicas de masa molecular menor a 100.000.Estos colágenos también forman parte de las gelatinas.
Derivados del colágeno
El termino cola animal, se aplica generalmente a colas preparadas a partir decolágeno de mamíferos, proteína principal del cuero, huesos y tendones. Otrostipos de cola de procedencia animal se designan de acuerdo con el material deque derivan; Por ejemplo, cola de caseina.
Distinción entre cola y gelatina Cuando el colágeno de proteínas insoluble se trata con ácidos, álcalis oagua caliente, se convierte lentamente en un material soluble. Si la proteínaoriginal es bastante pura y la transformación se hace por procesos lentos, elproducto de lato peso molecular se llama gelatina y puede emplearse con finescomestibles y fotográficos. El material de peso molecular mas bajo producidopor tratamiento mas energético de fuentes de colágeno menos tratables esnormalmente mas oscuro y esta mas impurificado. A esto se le llama cola animal.Los materiales intermedios pueden denominarse gelatinas técnicas o colas dealta calidad. La distinción es sin embargo arbitraria y se basa mas en lapureza que en las propiedades físicas. Por ejemplo ciertas gelatinascomestibles pueden tener pesos moleculares mas bajos que los de la mayor partede las colas.
Fabricación de colas animales La composición química del colágeno obtenido a partir de una gran variedadde mamíferos terrestres varia muy poco. Esto es cierto igualmente tanto si separte de huesos como de cuero. La mayor parte de colas animales se fabrican basándoseen huesos o cueros de ganado. Se clasifican en dos tipos principales: cola dehuesos y cola de cuero. La diferencia entre ambos tipos se debe principalmente alos diferentes métodos de tratamiento. Una pequeña cantidad de cola se hace también de cuero de conejo.
Cola de huesos El colágeno de huesos solo puede convertirse en gelatina de alto pesomolecular después de la limpieza y desmineralización con ácidos. Si loshuesos se tratan sin desmineralización se obtiene un material de peor calidad:la cola de huesos. Los huesos se desengrasan en primer lugar, bien exponiéndolos al vapor dedisolventes en ebullición, tales como bencina, o en los procesos mas modernos,mediante impulsos mecánicos transmitidos a través del agua fría. El procesode desengrase en frío perjudica menos al colágeno y hace posible la obtenciónde productos de mayor peso molecular. Después de la limpieza mecánica (pulido)los huesos desengrasados se trasladan a autoclaves y se trasladanalternativamente con vapor a presión y agua caliente, durante varios ciclos. Elvapor convierte el colágeno en cola y el agua la extrae de los huesos. De estaforma se obtiene la cola como una sucesión de soluciones diluidas. Estas puedenmezclarse o emplearse para extraer en contracorriente subsiguientes series. Lasprimeras soluciones, que se han expuesto al mínimo calor, dan las colas de lamas alta calidad.
Cola de cuero La mayor parte del cuero usado en la fabricación de cola y gelatina es eldesecho de las fabricas de curtidos, donde recibe un corto tratamiento con aguasaturada de cal. Los trozos de cuero que pueden dar origen a gelatinas de altacalidad reciben un tratamiento posterior con cal. Después de la separación dela cal con agua y ácido, se hacen algunas extracciones con agua a temperaturascrecientes para obtener una serie de soluciones diluidas. Los últimos de estosproporcionan gelatina técnica o cola de cuero. Gran parte de la cola de cuerose obtiene directamente de los desechos de las fabricas de curtidos, sintratamiento posterior con cal, en especial de las raspaduras de la pare interiordel cuero, llamadas descarnaduras. Este material debe ser tratado con agua atemperatura relativamente alta para obtener soluciones de cola.
Proceso final. Diferentes formas de cola Las soluciones diluidas de cola de huesos y de cuero se tratan de igualforma. Generalmente no se filtran en esta etapa, pero se pueden decolorar y seles puede añadir agentes preservativos. Después se concentran en evaporadoresde vacío. Antiguamente se dejaban solidificar estas soluciones concentradas enforma de gelatina y se cortaban en planchas gruesas que se dejaban secarlentamente. La cola que se vende en esta forma se conoce como cola escocesa. Hoydía la cola se muele para formar un polvo, que es de empleo mucho mas practico,tiene la gran ventaja de permitir al fabricante la mezcla de diferentes seriesde cola, de manera que se obtengan partidas uniformes con propiedadesespecificas. Las colas se pueden vender también como cubos o perlas. Estos son resultadode procesos de secado especiales y para muchos fines es conveniente emplearlossin molienda. Las colas también se pueden expender directamente en tanques enforma de solución concentrada en caliente obtenida del evaporador. Las colasliquidas que no solidifican en forma de jalea a temperatura ordinaria, sefabrican añadiendo productos químicos que modifican las propiedades desolidificación de las colas animales ordinarias. De esta forma se fabricanproductos con un amplio intervalo de propiedades. Del colágeno del pescado seobtienen también colas no gelatinosas.
Composición de las colas animales Las colas y gelatinas contienen normalmente alrededor de un 15% de agua y un1-4% de sales inorgánicas. Pueden contener también una pequeña cantidad degrasa. La principal impureza de alto peso molecular se ha identificado como uncomplejo mucoproteico coagulable por el calor. La cola de huesos puede contenerhasta un 6% de este material. Estas impurezas no tienen importancia o muy poca,para la mayoría de los usos de la cola. Las propiedades dependen del mayorconstituyente proteínico derivado de la ruptura del colágeno. Gelatina se lellama al mayor constituyente proteínico de las gelatinas y las colas. Lasgelatinas mas puras constan en gran parte de gelatina y agua. La gelatina no puede considerarse como una sustancia simple, aunque, por loque se sabe, las diferencias entre las clases de gelatinas obtenidas dediferentes orígenes son pequeñas. Sin embargo la gelatinas de una mismaprocedencia pueden tener propiedades físicas muy diferentes como resultado dediferencias en el proceso de obtención y en especial, de las diferencias en elgrado de degradación que hayan sufrido al obtenerlas a partir del colágenooriginal.
GELATINA La gelatina es una proteína coloidal soluble en agua, hidrófilaobtenida por hidrólisis controlada del colágeno (tejido conectivo fibrosoblanco) que inicialmente es insoluble en agua. El colágeno (anhídrido de gelatina) se compone de monómerosde tropo-colágeno dispuestos en forma de fibrillas entrelazadas que seconfiguran en tres cadenas pépticas distintas. El número y el tipo de enlacescovalentes que se establecen entre estas cadenas aumentan con la edad del animal(el menor número en los animales más jóvenes). Estos enlaces influyen en laspropiedades moleculares de la gelatina resultante. La conversión del tropo-colágeno en gelatina requiere de laruptura de los enlaces de hidrógeno que estabilizan la hélice, transformándolaen la configuración al azar de la gelatina. El producto hidrolizado depende delos enlaces cruzados que queden entre las cadenas peptídicas y de los gruposreactivos terminales aminos y carboxilos libres que se formen. Dado que las trescadenas no son idénticas, después de la degradación resultan tres tipos básicosde nuevas cadenas: las cadenas alfa, compuestas de una sola cadena peptídica,las cadenas beta, formadas por dos cadenas peptídicas conectadas, y las cadenasgamma, con tres cadenas peptídicas interconectadas; por ello, una muestra degelatina tiene varios pesos moleculares. La distribución de pesos molecularesde la gelatina determina características como la dispersabilidad en agua, laviscosidad, la adherencia y la resistencia de los geles. Cuando la concentraciónrelativa de moléculas de bajo peso molecular aumenta, se reduce la viscosidad yla resistencia de los geles. Este efecto usualmente se debe a la exposición delcolágeno y la gelatina a temperaturas elevadas o a una elevada acidez oalcalinidad, aunque también puede influir la calidad de la materia prima y eltiempo de maceración en álcali. La gelatina es un derivado proteico albuminoide, a diferenciade las gomas naturales (con las que comparte algunas propiedades físicas) queson polisacáridos, y por ello tienen una composición química completamentedistinta. Por ejemplo, el agar-agar también forma geles pero es un éster delácido sulfúrico con una serie compleja de polisacáridos obtenidos de un alga.Otros extractos de alga son la gelatina japonesa o la "isinglas"japonesa (agar vegetal), la goma china o la goma irlandesa. La pectina tambiéntiene capacidad para formar geles, pero se obtiene de las frutas. Otro productoque a veces se confunde con la gelatina es la goma explosiva (gelatinaexplosiva) que es una mezcla de nitroglicerina y tierra de diatomas. No tienenada que ve con la gelatina de origen animal. Desde el punto de vista químico, el colágeno y la gelatinaestán compuestos de largas cadenas de aminoácidos unidos por enlaces peptídicos;los aminoácidos contiene grupos de funcionales ácidos y básicos. En lacomposición en aminoácidos del colágeno y de sus derivados, gelatina y cola,prácticamente no hay triptófano y las concentraciones de metionina, cistina ytirosina son muy bajas. Por esta razón, no es una proteína completa desde elpunto de vista nutritivo ya que no aporta las necesidades totales de aminoácidosesenciales (los aminoácidos que no puede sintetizar el organismo en cantidadessuficientes y deben ser aportados por la dieta). Sin embargo, si la gelatina seincluye en una dieta normal en conjunción con otras proteínas, puede enalgunos casos incluso aumentar el valor biológico de la proteína añadida. Enestos casos de combinación proteica la gelatina es una buena fuente de proteínas.Cuando se emplea un sustituto del azúcar con la gelatina, los postres obtenidosson muy adecuados para regímenes ya que requieren más calorías para serdigeridos de las que ellos mismos aportan (principio de la acción dinámicaespecífica). La gelatina se emplea con frecuencia como agente terapéuticoen casos de alimentación infantil y en pacientes con problemas digestivos, conúlceras pépticas, desordenes musculares y para favorecer el crecimiento de lasuñas. A diferencia de otras proteínas, el colágeno tiene una gran riqueza delos aminoácidos prolina e hidroxiprolina. La cantidad de esos aminoácidos esusualmente un índice de la cantidad de colágeno en una mezcla de proteínas.
MATERIAS PRIMAS El colágeno constituye el 30% de toda materia orgánica delcuerpo de un animal, o el 60% de las proteínas totales del cuerpo, por lo cuales obvio que se pueden utilizar muchos tejidos como materia prima para lafabricación de gelatina. Los tejidos con las mayores cantidades de colágeno,que se pueden encontrar entre los subproductos son usualmente las pieles y loshuesos. El resto de las materias primas solo se emplean en pequeñas cantidades.En contra de la opinión popular, los cuernos, los pelos, las plumas y las cáscarasde los huevos no se pueden emplear para fabricar gelatina.
FABRICACIÓN DE GELATINA El objetivo en la elaboración de gelatina es controlar lahidrólisis del colágeno (de diversas procedencias) y convertir el productoresultante en un material soluble con las propiedades físicas y químicasdeseables, entre las que están la resistencia de los geles, adherencia, color,consistencia y transparencia. Esencialmente, el proceso consiste en tres etapasfundamentales:
Todos estos pasos y la materia prima inicial influyen en lacalidad y rendimiento. Es necesaria una hidrólisis controlada para convertir elcolágeno (cuyo peso molecular oscila entre 345.000 y 360.000) en gelatina (conun margen de pesos moleculares de 10.000 a 65.000, y solo e algunos casosllegando a 250.000). sin embargo, una hidrólisis prolongada provoca pérdidasen los rendimientos y en las propiedades deseables. Asimismo, la naturaleza ycondiciones de la materia prima pueden influir notablemente en el productofinal. La gelatina obtenida no solo puede variar dependiendo de la propianaturaleza de la materia prima sino que también puede variar si los productostienen distintas procedencias e incluso dentro de los mismos productos de unamisma procedencia se producen diferencias diarias de origen biológico. Esencialmente existen tres procesos para obtener gelatina apartir del colágeno con variaciones y combinaciones de los procedimientos. Losprocesos básicos son los denominados alcalino, ácido y por vapor a presión.
Procedimiento alcalino (gelatina tipo B) El sistema más ampliamente empleado a nivel comercial es elsistema alcalino. Cualquier material con colágeno (pieles, nervios, oseína delos huesos) puede procesarse con esta técnica. La materia prima conteniendo colágenose lava bien en un cono de lavado, que es un recipiente de forma cónica que sedesplaza en un tanque, en un agitador cilíndrico (particularmente útil en elcaso de los huesos) con un cilindro rotativo que eleva materia prima y la dejacaer en el agua, o en un lavadero de pulpa de papel, que consiste en un tanquesemicircular y una paleta rotativa suspendida por encima, que emergeparcialmente en el baño (similar al sistema empleado en las industrias decurtición). En el baño se consigue que la materia prima se remojeperfectamente con agua fría. A continuación, se sustituye el agua por unasolución de hidróxido cálcico, preparada disolviendo cal (oxido de calcio) enagua. Normalmente se añade cal en exceso para mantener una concentraciónsaturada de hidróxido cálcico durante todo el prolongado periodo detratamiento, aunque un procedimiento alternativo consiste en renovar periódicamenteel agua de cal durante el tratamiento. La cantidad de cal utilizada esaproximadamente el 10 % del peso de la materia prima. Se puede utilizarcualquier base soluble en agua, pero la cal es preferible porque su solubilidada saturación consigue de una forma regular la alcalinidad deseada y porque nohidrata tanto el colágeno como otras bases con el mismo valor del pH. Laalcalinidad hace que ls sustancias distintas del colágeno como las queratinas,globulinas, muco polisacáridos, elastina, musinas, albúminas y el mucus semodifiquen, haciéndose más solubles. También las grasas se convierten enproductos polares. De esta forma todos estos productos se eliminan fácilmentecon el subsiguiente lavado. El remojado alcalino o encalado produce tambiénalteraciones químicas (reacciones hidrolíticas) en el colágeno, pero sin quetenga lugar ninguna solubilización apreciable, por lo que la solubilización térmicatiene como misión solo romper las débiles fuerzas de tipo físico quemantienen la estructura fibrilar del colágeno. E el procedimiento del encaladose libera amoniaco que procede de los grupos amida del colágeno. Después deeste proceso las fibras de colágeno están hinchadas y la cohesión interna sereduce. Este hecho posiblemente se debe a la ruptura de ciertos enlaces peptídicosya a la introducción de nuevos grupos iónicos en las moléculas. Se tratafundamentalmente de un proceso de despolimerización en el que unos cuantosgrupos específicos se rompen, dando lugar a una hidrólisis de los enlacescruzados que mantienen las unidades de proto-colágeno, con lo que el colágenose convierte en un producto en el que solo se mantienen los enlacesintramoleculares de las unidades básicas, de forma que cuando la hélice sedespliega por efecto del calor las moléculas se solubilizan fácilmente en elagua. Existen datos que permiten pensar en el que el procedimiento alcalino lagelatina mantiene moléculas ligeramente ramificadas, con peso molecular mediode 30.000 (margen de 10.000 – 60.000). La duración del encalado depende de la materia prima y de latemperatura así como el producto final deseado, pero usualmente se requiere desiete días a tres meses, correspondiendo el periodo más prolongado alprocesado de la oseína. Los nervios requieren 30 – 45 días de encalado; laspieles de cerdo requieren de 15 – 20 días y no es necesario desgrasarlasantes. Las pieles curtidas con taninos vegetales se tratanpreviamente para eliminar los taninos con un álcali medio como el borato o elcarbonato sódico y posteriormente se extraen en el proceso alcalino. Los restosde pieles tratadas al cromo se remojan alternativamente en álcali diluido y ácidodiluido varias veces o en soluciones de carbonato de sodio o magnesio variasveces hasta que se elimina todo el cromo. A continuación la piel se encala, selava y se extrae en el proceso alcalino. Es posible reducir el periodo deencalado agudizando la alcalinidad de la salmuera con un 0.5 % de hidróxido sódicoo un 0.5% de carbonato sódico. Algunas veces también se añade cloruro cálcicocon un 0.1 % de metilamina a la salmuera. Durante el periodo de encaladodesciende el punto isoeléctrico del colágeno de una pH alrededor de 6.0 (día0) hasta 4.8 (a los 44 días), consiguiéndose la gelatina de máxima calidadcuando el punto isoeléctrico es de 5.0. el descenso del punto isoeléctrico conel tiempo posiblemente se debe a la eliminación del nitrógeno amídico, laformación de grupos carboxilos libres y la pérdida de otros grupos básicos.También depende del periodo de encalado la cantidad de gelatina que se puedaextraer, que aumenta desde el 6 % en el primer día al 37 % (extracción en unahora a 80 °C) después de 43 días en el baño de cal. Además, la resistenciade los geles (con un 6.66 % de gelatina) aumenta también desde 86 Bloom (cargaen gramos requerida para producir una depresión en el gel en condicionesnormalizadas) en el día 0 hasta 182 Bloom a los 43 días. Asimismo, laviscosidad aumenta también con el periodo de encalado. Sin embargo, si elperiodo de encalado es excesivo puede ser peligroso. Algunas veces el colágenose degrada totalmente de forma que no es posible recoger la gelatina. Elsobre-encalado puede presentarse cuando se procesan tejidos de animales jóveneso cuando la temperatura ambiente es superior a 30°C. No existen pruebas deprecisión para determinar el periodo idóneo de encalado. Los buenosresultados, en gran medida, aún son solo fruto de la experiencia. Una vezcompletado el periodo de encalado se rebaja el pH y la materia prima se lava conagua fría para eliminar la cal (la cal es más soluble en agua fría), lavadoque usualmente dura de 1 – 2 días. El colágeno se mantiene hinchado y conuna reacción alcalina después del lavado y hay que neutralizarlo con ácidoclorhídrico o ácido sulfuroso diluidos (el ácido se obtiene disolviendo el dióxidode azufre en agua, que también blanquea y conserva el producto). Este procesose continúa hasta que el colágeno se deshincha y pierde consistencia. Entoncesse lava el ácido y se hace un lavado final con sulfato alumínico o sulfato dezinc diluidos. Estos productos endurecen el colágeno y mejoran ligeramente elcolor. Si se va a fabricar cola se emplean mayores cantidades de sulfato de zincpara controlar el crecimiento bacteriano. La materia prima debe tener entoncesun pH entre 5 y 8 (normalmente entre 6 y 7) y está lista para la extraccióndel colágeno en forma de gelatina. La materia prima tratada se carga en recipientes de extraccióny se procede a una serie de cocciones (normalmente de 6 a 12, que reciben elnombre de primera, segunda, tercera, etc) cada vez a mayor temperatura. Lasextracciones usualmente se empiezan a 54 – 60 °C durante 3 – 5 horas y sesigue hasta la temperatura de ebullición. El producto de mayor calidad (el demayor resistencia de los geles y mayor transparencia) se obtiene a lastemperaturas de extracción más bajas, pero el rendimiento aumenta a lastemperaturas superiores. Lo más común es conseguir un 1 – 5 % de cola ogelatina en cada extracción. El residuo o "chicharrón" se prensa, seseca y se vende como alimento para el ganado o fertilizante. Cada extracción seobtiene y se procesa por separado. Los extractos líquidos se filtran a presión en filtros decelulosa esterilizada al vapor, para aumentar la transparencia y eliminar laspartículas en suspensión. A veces se emplea la centrifugación con tal fin,pero presenta el inconveniente de que se forma espuma fácilmente. Lassoluciones de gelatina son difíciles de filtrar porque se obturan los poros.Con frecuencia, se añade tierra de diatomeas para facilitar la separación delas pequeñas partículas coloidales. En algunos ensayos de investigación aúnno comerciales se ha visto el carbón activado añadido al 5 % y mantenido ensolución durante 4 – 6 horas a 55 – 60 °C y posteriormente separado porcentrifugación o filtración consigue la decoloración de las soluciones. Otrométodo de clarificación consiste en la adición de sulfato de aluminio o unaproteína coagulable por el calor, como la albúmina de huevo, con posteriorcalentamiento para coagular la proteína (este procedimiento) no se usa a nivelcomercial). El precipitado floculento aglutina las proteínas que producenturbidez, que pueden así eliminarse fácilmente por filtración o centrifugación. Normalmente es necesario someter la gelatina a desionizaciónsi se quiere que el contenido en cenizas sea inferior al 0.5 %. Para ello, sehace pasar la solución de gelatina a través de una resina de intercambio decationes fuerte, intercalada con una resina de intercambio de aniones fuerte ,ambas con un tamaño de partículas grande, de 20 – 50 mesh. La ultrafiltraciónen membrana de exclusión para moléculas de peso inferior a 25.000 también seemplea como proceso de desmineralización. La evaporación del exceso de agua es muy crítica ya que elaumento de temperatura e presencia de humedad (que produce una hidrólisis delos péptidos) reduce la calidad de la gelatina y un periodo excesivamenteprolongado de evaporación permite el desarrollo microbiano, que también reducela resistencia de los geles. La primera extracción debe tener la concentraciónadecuada y la suficiente resistencia de los geles para que gelifique si se enfría,pero las extracciones sucesivas a mayores temperaturas usualmente exigen laaplicación de un proceso de evaporación a vacío para su concentración aniveles suficientes para gelificar. Para ello se emplean evaporadores de tripleefecto o evaporadores a vacío dispuestos después de un cambiador de calor queeleva la temperatura de las soluciones a 80 – 90 °C. Con los evaporadores avacío se llega a conseguir una concentración de 11 – 17 % partir de losextractos de pieles, del 33 – 42 % en el caso de los extractos de huesos yhasta del 50 % en colas de baja calidad. La solución concentrada de gelatina se echa sobre unaplancha en la que se enfría y se solidifica (con un máximo de 12 mm deespesor), se extrae entonces de la plancha y se coloca en unas redes (de telametálica) colocadas en unos marcos. Los marcos que contienen los geles sellevan a los túneles de desecación. El aire que entra en dichos túneles selava, se filtra y se deseca previamente, haciéndolo circular encontracorriente, es decir, en dirección opuesta a las bandejas conteniendo losgeles. La temperatura del aire se eleva gradualmente para prevenir los problemasde descamación de los geles o endurecimiento superficial. Si el aire es seco,la evaporación es suficiente para enfriar los geles y mantener la temperaturapor debajo de su punto de fusión. En 8 – 12 horas se llega a obtener una láminatransparente quebradiza, con un 10 % de humedad. La gelatina sólida secomercializa en láminas o se tritura en gránulos de 35 – 40 mesh, aunque enalgunos casos también se convierte en polvo. La desecación en cilindros, con un equipo similar alempleado para obtener leche en polvo, es un método alternativo de eliminar lahumedad. El líquido clarificado se distribuye en una fina película sobre ungran cilindro (6 m de diámetro) calentado por vapor que circula por una doblepared, consiguiendo en menos de 1 minuto una película fina de gelatina desecadaque se retira del cilindro con la ayuda de unas cuchillas adecuadamentedispuestas. La gelatina se puede someter a extrusión como los fideos ydesecarse de esta manera sobre cintas transportadoras en túneles de desecación. Para conseguir la deseable resistencia de los geles yviscosidad, usualmente se mezclan productos procedentes de distintasextracciones. A la gelatina se le pueden adicionar aditivos como elglicerol o el azúcar o el aceite de alquitrán para mejorar su flexibilidad.
Precursor ácido (gelatina tipo A) El proceso ácido del colágeno se aplica usualmente a laspieles de cerdo y a los huesos, aunque sea posible preparar la gelatina a partirde cualquier producto conteniendo colágeno con este procedimiento. La técnicaes particularmente útil si la materia prima contiene hueso o cartílagos. Es unprocedimiento muy importante en Estados Unidos para preparar gelatina comestiblea partir de cortezas de tocino congeladas (lo más popular) o saladas. Lascortezas se lavan primero para eliminar la sal o cualquier materia extraña quepuedan contener (por ejemplo sangre). Como las cortezas suelen tener del 8 –15 % de grasa es preferible quitársela antes de proceder al proceso del ácido.Para ello, se calientan las cortezas en agua caliente (55 – 60°C) dos o tresveces, agitándolas durante 4 – 6 horas para que se funda la grasa y quede enla superficie. Finalmente se lavan las cortezas en agua caliente a 40 – 55 °C.También es posible extraer la grasa con solventes, siendo los más empleados elhexano o el dicloruro de dietileno, ambos de calidad alimentaria. El proceso deextracción se sigue de un lavado para eliminar los residuos de solvente. Dadaslas dificultades de manipulación de las emulsiones que se forman, los solventesse emplean poco. Las cortezas bien recortadas (si hay un exceso de grasa elproducto final es turbio) se descongelan, se lavan en agua fría y se remojan enuna solución diluida (alrededor del 5%; 1N en el caso de las sinovias) de un ácidoinorgánico como el clorhídrico, sulfuroso (dióxido de azufre en agua), fosfóricoo sulfúrico, de forma que el valor del pH sea alrededor de 4. Los ácidos sulfúricoy sulfuroso se utilizan con una normalidad de 1 – 1.5, requiriendo periodos másprolongados de remojo. A este pH ácido el colágeno se hincha y se produce unaconsiderable solubilización. El remojo en ácido se mantiene de 10 – 72 horas(24 – 48 horas en el caso de las sinovias, 48 – 72 horas para los cartílagosde las escápulas), renovando el ácido a las 24 – 36 horas. Si el periodo deremojo en ácido se prolonga, aumenta el rendimiento de colágeno extraído,pero se reduce la resistencia de los geles y la viscosidad. Finalmente, se quitael ácido y se procede a un lavado para elevar el pH de la materia prima a 4.5.A veces se hace un enjuague con hidróxido sódico al 5 – 8 % para elevar elpH a 6 – 6.5. El lavado se continúa para eliminar las sales formadas. Si seemplean los ácidos sulfúrico o sulfuroso, las sales formadas son menossolubles y es necesario prolongar los lavados. La mayoría de las proteínas queacompañan al colágeno en la materia prima tienen un punto isoeléctrico de 4– 5 y en consecuencia son menos solubles y se coagulan rápidamente durante laextracción. A este valor del pH el colágeno nativo se encuentra hinchado. Elproceso ácido da una gelatina con un punto isoeléctrico de 8.9 (margen 8.5 –9.4). El proceso ácido parece que solo produce una reorganización física delas estructuras del colágeno, con un mínimo de cambios hidrolíticos. Enconsecuencia hay solo un incremento ligero de los grupos amino primarios y delos grupos carboxilo libres. El peso molecular medio de los productos obtenidosen el proceso ácido es de 70.000 – 90.000, excepto en el caso de las vejigasnatatorias del esturión, en que se han dado pesos moleculares del orden de250.000. Después del tratamiento ácido, el colágeno se extraesiguiendo el mismo procedimiento que el proceso alcalino, excepto que lascortezas de cerdo se pueden extraer empezando a menor temperatura que las pielesde vaca. La filtración también es más fácil. La desecación de los extractostambién se completa igual que en el proceso alcalino. La gelatina obtenida a partir de las cortezas de cerdo tieneuna mayor resistencia de los geles y más transparencia y mejor color que laobtenida de las pieles de vacuno en el proceso alcalino. De las sinovias seconsigue también un buen producto y usualmente se hacen múltiplesextracciones. La decantación y clarificación de las sinovias se hace a 50 –60 °C y se consigue un extracto bastante claro. Si se utilizan ácido sulfúricoo sulfuroso los extractos están más turbios y puede que sea necesariosometerlos a filtración o floculación. La desecación de los extractos desinovias se puede hacer en secadores de tambor aunque se consigue un producto demayor calidad desecándolos por el procedimiento del túnel de enfriamiento ydesecación. El isinglas se extrae en agua a 55 – 60 °C durante 4 – 6horas. Las materias primas antiguas pueden requerir una segunda extracción. Losextractos se filtran, se concentran por centrifugación en flujo continuo y seevaporan a vacío. Después se desecan en tambor o se enfrían (5 – 10 °C) yse desecan en túneles (60 – 70 °C) hasta un 8 – 10 % de humedad. Parece que la gelatina obtenida en el proceso ácido mantienemuchos de los enlaces cruzados del colágeno y se ha sugerido que este tipo deproducto reciba el nombre de colágeno fundido soluble. Con el pretratamiento ácidose consigue una gelatina con un punto isoeléctrico de 8.9 ya que se consideraque el proceso ácido solo consigue provocar reorganización física de laestructura del colágeno con un mínimo de cambios hidrolíticos y enconsecuencia solo hay un pequeño incremento de grupos amino primarios y escasosgrupos carboxílicos libres. El material mantenido en ácido se somete a una serie decocciones. La extracción inicial se hace aproximadamente a 60 °C y latemperatura se eleva en 5 – 10 °C en cada extracción sucesiva.Comercialmente se realizan de 8 – 10 extracciones y los productos se desecan rápidamentepara prevenir su degradación y la contaminación microbiana. Cada extractodesecado se clasifica de acuerdo con su resistencia de los geles y viscosidad,mezclándose diversos productos para conseguir las propiedades deseadas. Las gelatinas obtenidas en los procesos ácido y alcalino sondistintas y por lo tanto los productos no son sustituibles sin más el uno porel otro en una misma aplicación comercial.
Propiedades físicas Viscosidad Por encima de 35-400C, en que la temperatura es bastante alta paraimpedir la agregación molecular debida a las fuerzas de gelificacion, laviscosidad de las soluciones de las distintas gelatinas depende de laconcentración y la temperatura, de la misma forma que para una serie de polímeroshomólogos. Aun cuando los resultados deben determinarse empíricamente larelación entre viscosidad con la temperatura o con la concentración forman unaserie uniforme y no se cruzan uno con otro. A cualquier concentraciónnormalizada la viscosidad de la solución de una indicación medianamente exactadel peso molecular, al menos para gelatina de punto isoelectrico similar. La viscosidad de las soluciones de gelatina se ve afectada también por el phy por la presencia de sales. Estos efectos que son relativamente pequeños aconcentración normal son muy marcados en soluciones diluidas. Por ejemplo consoluciones del 0.2% de una gelatina desionizada de punto isoelectrico 5.1 elincremento de viscosidad debido a la gelatina era seis veces mayor a ph3 que aph 5. Tales efectos se explican por el desarrollo de las moléculas de gelatina,debido a la repulsión de los grupos ionizados al variar la carga de las moléculas.Estas repulsiones ionicas se reducen en presencia de electrolitos. Al decrecerel ph por debajo del correspondiente punto isoelectrico, la molecula se dilataal principio y aumenta la viscosidad debido a la carga creciente de la moléculas.Por debajo de ph 3, al aumentar la cantidad de electrolito se reduce de nuevo laviscosidad. A temperaturas por debajo de 35-400C, las moléculas comienzan aagregarse bajo la accion de las fuerzas de gelificacion y la viscosidad de lassoluciones aumenta con el tiempo y puede ser no newtoniana. Rigidez de los geles La rigidez de los geles depende de la concentración de gelatina, tiempo demaduración, ph y temperatura. Los cambios en la concentración afectan de formasimilar a todas las gelatinas, dependiendo la rigidez aproximadamente delcuadrado de la concentración de la gelatina. La variación en la rigidez de losgeles con el tiempo también sigue un curso similar con diferentes gelatinas.Por ejemplo con gelatinas de alta calidad, la rigidez de los geles maduradosdurante 24h a 100C aumenta a aproximadamente 0.4% por hora aunque lamitad del valor que corresponde a las 24h se alcanza en una hora. La rigidezsigue aumentando lentamente durante un largo periodo. La rigidez de los geles depende del ph de una manera no totalmentepredecible. Con las gelatinas de bajo punto isoelectrico, la rigidez cambia pocoentre ph 5 y ph 9, pero decrece bruscamente por debajo de ph 5. Estos efectosson mas pronunciados con geles de poca consistencia. La rigidez depende mucho dela temperatura, pero la relación es compleja y varia de una concentración aotra. Así con geles preparados a partir de dos gelatinas diferentes, uno puedetener la rigidez mas alta a 100C y el otro a 200C. Talesefectos son mas pronunciados cuando los puntos de fusión de los geles son muydiferentes, puesto que en general, la velocidad de cambio de la rigidez con latemperatura aumenta cuando se esta próximo al punto de fusión. El punto defusión puede definirse como la temperatura a la cual la rigidez se hace cero. Por encima de un cierto peso molecular, la rigidez de un gel madurado a 00Ces independiente del peso molecular de la gelatina. Por debajo del valor criticodel peso molecular, la rigidez cae bruscamente a cero. Con la gelatinasnormalmente que tienen una amplia distribución de pesos moleculares, la rigidezdepende del peso molecular solo en cuanto concierne a la proporción de moléculasque tienen pesos moleculares por debajo del valor critico. Este valor critico seeleva cuando la temperatura a la cual se mide la rigidez, de modo que cuando altemperatura se aproxima al punto de fusión de la gelatina, la rigidez se hacecada vez mas dependiente del peso molecular. Estos efectos se muestranclaramente fraccionando una gelatina mediante precipitación con alcohol. Todaslas fracciones excepto las de peso molecular mas bajo, tienen la misma rigidez a00C. Esta rigidez da una medida de las características degelificacion intrínsecas de la gelatina considerada. La característicaestructural determinante de este factor de gelificacion no se conoce, pero puedemodificarse durante la fabricación. En general las condiciones de degradacióndurante la fabricación son tales que el peso molecular y el factor degelificacion disminuyen de forma que en las gelatinas comerciales se observafrecuentemente cierta relación entre rigidez y viscosidad. Esto se hace masmarcado con productos de calidad inferior, en lo que puede haber un granproporción de moléculas con pesos moleculares por debajo del valor critico deformación de gel. La degradación en medio ácido disminuye el peso molecularsin afectar el poder de gelificacion. En medio neutro o alcalino disminuyentanto el peso molecular como el factor de gelificacion. Esta claro que la baja rigidez obtenida con material de peso molecular muybajo resulta del acortamiento de cadenas hasta el punto en que ya no puedentomar parte de manera efectiva en la formación del gel. Algunos autores (ferry)sugieren que la gelificacion es el resultado del encadenamiento de moléculas enregiones de la cadena mas bien limitada, no se formara retículo alguno cuandola cadena contenga solamente dos o menos de tales regiones, lo que puede ocurrircuando el peso molecular es alrededor de 20000. La naturaleza de las regionescapaces de formar enlaces puede relacionarse con la estructura del aminoácido.Si la forma de unión entre los grupos -CO y –NH de cadenas vecinas es un enlace de hidrogeno múltiple, solamentelas regiones libres de cadenas laterales voluminosas y con carga son capaces deformar eslabones fuertemente estables. La rigidez referida es el modulo de rigidez para pequeñas deformaciones. Lastensiones finales de rotura para geles que tienen la misma rigidez pueden sermuy diferentes y dependen del peso molecular. La fusión de los geles y la solidificación de soluciones Las propiedades de la gelatina durante las transformaciones sol/gel y gel/solson difíciles de investigar debido a que con el tiempo cambian. Las medida hasido principalmente la temperatura de fusión de los geles y la temperatura otiempo de solidificación de las soluciones. En la gelatina, estos cambios notienen lugar a temperaturas bien definidas, como sucede en las sales puras. Losresultados dependen de las mismas variables que la viscosidad y la rigidez, perodependen también del método de medida y en particular, de la velocidad devariación de la temperatura durante la medida. Punto de fusión Cuando un gel se calienta muy lentamente cerca del punto de fusión, tienenlugar variaciones en la estructura del gel que afecta la fusión, se hademostrado que el punto de fusión de los geles es máximo cuando han sidomadurados durante largos periodos a una temperatura próxima al punto de fusión.Después de este periodo de maduración, enfriando el gel hasta una temperaturabaja, lo cual aumenta en gran manera la rigidez, no varia el punto de fusión.La estructura formada a la alta temperatura de maduración controla el punto defusión y persiste durante el periodo en el cual se forma y se rompen nuevosenlaces si el gel se enfría y se calienta de nuevo. El punto de fusión dependedel enlace mas fuerte en el gel, mientras que la rigidez a una temperatura dadadepende del numero total de enlaces que existen a esa temperatura. Los fuertesenlaces formados cuando las geles se maduran a temperaturas próximas al puntode fusión, en las que el retículo del gel esta abierto y las moléculasindividuales tienen mayor movilidad, son probablemente resultado de un sistemade enlaces de hidrogeno altamente conjugados que pueden formarse mas fácilmenteen estas condiciones. Cuando la temperatura se eleva hasta el punto de fusión, de forma que serompa el retículo del gel, las moléculas no se dispersan una a una sino quepermanecen formando agregados, estos agregados pueden persistir durante untiempo considerable, aun a temperaturas de algunos grados por encima del puntode fusión. La formación de geles. Agregación molecular La solidificación de las soluciones de gelatina para formar un gel cuando latemperatura disminuye, esta precedida por la formación de grandes agregadosmoleculares y un consiguiente aumento en la viscosidad de la solución. Segúnva avanzando la solidificación, los agregados empiezan a unirse entre si y lasolución se hace viscoelastica. Finalmente solidifica en un gel que tiene muypoca tendencia a fluir bajo carga. La agregacion de moléculas de gelatina sepuede estudiar mas fácilmente en soluciones frías que estén demasiadodiluidas para gelificarse. Se ha demostrado que a una temperatura dada, el tamañode los agregados depende de la concentración de la solución de gelatina de lacual proceden; pero que una vez formados son relativamente estables y permanecencomo antes, individuales si la solución se diluye. Esto indica la existencia decierta forma de unión múltiple tal como enlaces de hidrogeno múltiples y estade acuerdo también con la histeresis normalmente observada en las solidificacióny fusión de la gelatina, por lo cual el punto de fusión es mayor que el puntode solidificación. El punto de solidificación de las soluciones de gelatina se determinadejando soluciones durante un largo periodo y determinando la temperatura máximaa la que se forman los geles. Otra medida que se hace con frecuencia es eltiempo de solidificación de las soluciones a temperatura inferior al punto desolidificación. El método más satisfactorio es determinar el tiempo de solidificación deuna gota que se ha enfriado rápidamente, hasta la temperatura a la que ha demedirse el tiempo de solidificación.
Clasificación y ensayos de las colas Los ensayos recomendados para las colas animales vienen dados en la BritishStandard Sampling and Testing Glues. Muchos de los ensayos no afectan elencolado. Las colas se clasifican por lo general atendiendo a la resistencia delgel formado en condiciones normales, aunque la viscosidad es también unapropiedad importante. Ensayo de la resistencia de la gelatina El método mas generalizado para medir la resistencia de la gelatina es pormedio de un gelometro Bloom. En el ensayo de la British Standard se prepara unagelatina a una concentración de cola del 12.5% en un recipiente de vidrio y semadura durante 18h a 100C. La resistencia de la gelatina se determinadespués mediante una pieza con un sección transversal de media pulgada, que sepresiona lentamente dentro de la superficie del gel cargándola con perdigones.La caída de los perdigones se corta eléctricamente cuando la pieza harecorrido 4mm. El peso de los perdigones en gramos da la resistencia Bloom de lagelatina. Los geles de gelatina se ensayan al 6 2/3%. Y esta concentraciónpuede usarse para algunos colas de alta calidad. Los resultados de ensayosobtenidos al 12.5%, se denominan algunas veces valores de doble Bloom, paradistinguirlos de los resultados obtenidos a 6 2/3%. El valor Bloom doble es muyaproximadamente tres veces mayor que el del Bloom sencillo. En Estados Unidostodas las colas son ensayados al 12.5%. La resistencia Bloom de la gelatina es un ensayo empírico, pero losresultados están relacionados de una forma sencilla con el modulo de rigidezabsoluto del gel por la ecuación: resistencia de la gelatina (g Bloom)=20+2.86X10-3 X rigidez (din/cm2)17. Resistencia de gelatina de las colas La resistencia de gelatina de la colas de cuero pueden variar desde 40 a4000g Bloom doble, aunque se encuentra normalmente entre 100 y 300 g. Las colasde huesos han cubierto tradicionalmente el intervalo de 40-150g.
Viscosidad
La viscosidad se mide normalmente en una solución al 2.5% en un viscosimetrode tubo U calibrado de modo que se obtenga el resultado en unidades absolutas(centipoises). La norma británica recomienda un temperatura de 600C.Sin embargo, frecuentemente se opera a una temperatura de 400C. La viscosidad a 400C puede obtenerse a partir de la viscosidad a 600C.
Preservación de la calidad de la cola La viscosidad y la resistencia de gelatina de la cola no son propiedadescompletamente estables y pueden empeorarse si las soluciones se manejanindebidamente. Se dice que la cola se degrada, lo que tomado en sentido literalsignifica que se reduce de una calidad mas alta a otra mas baja. La degradaciónse origina por calentamiento prolongado o por acción de bacterias ymicroorganismos. Por lo tanto se debe evitar todo calentamiento innecesario. Porlo general es tan indeseable como innecesario calentar las soluciones de colapor encima de 600C, a esta temperatura la viscosidad y la resistenciade la gelatina pueden decrecer en un 0,2-1,0% por hora, dependiendo de lacalidad y de las enzimas bacterianas presentes. A 800C la velocidadde degradación es aproximadamente es aproximadamente cuatro veces mayor que a600C. En soluciones en ebullición la degradación es muy rápida. Atemperaturas próximas a 400C la degradación térmica es muy lenta,pero la degradación puede ser todavía rápida si existen bacterias. Las colasmodernas contienen generalmente preservativos que impiden el crecimiento debacterias, aunque puede haber todavía variaciones en la velocidad de degradaciónentre las colas de la misma calidad, debidas a la presencia de enzimasbacterianas, las cuales pueden causar degradación incluso cuando se inhiba elposterior crecimiento bacteriológico. Es aconsejable no confiar enteramente enla acción de los preservativos y siempre que sea posible, preparara las colasen series separadas, a fin de no mezclar una cola nueva con materiales viejos yposiblemente contaminados.
Diagrama de flujo en la extracción de cola y gelatina
Comparacion de la cola animal con otros adhesivos con la cola nimal pueden unirse superficies, si estas son susceptibles de serhumedecidas por agua y si una de ellas es permeable al agua. La cola animaltiene ciertamente desventajas en comparacion con algunas colas sinteticas quepueden emplearse para las mismas finalidades. La solidificacion es mas lenta aaltas temperaturas. En condiciones humedas las juntaas se debilitanconsiderablemente y pueden quebrarse facilmente cuando se les somete a esfuerzo,aunque una estructura puede resistir la accio de la interperie si las juntasencoladas estan situadas lo bastante profundas para quedar protegidas. Porejemplo, las colas animales se usaron con buenos resultados para el ensamblajede marcos de ventanas antes de que fueran conocidas las colas sinteticas. Porotra parte, la cola nimal posee algunas ventajas sobe las colas sinteticas. Comoraramente se emplean endurecedores, las soluciones preparadas de cola animaltienen un tiempo de empleo util muy largo y un duracio de almacenamientoindefinida en comparacion con las colas sinteticas. Las colas animales de buenacalidad no se cuartean en una linea gruesa de cola. La cola seca no es tan duracomo la cola fenolica y de urea-formaldehido y es emnbos perjudicial para lasherramientas de corte. La mas importante propiedad de la cola animal es, sin embargo, su poder degelificacion y su principal ventaja radica en la explotacion de esta propiedad.La rapida solididficacion inicial de una junta encolada, producida porgelificacion, es util en el ensamblaje de estructuras en las que la union porabrasadera es dificil o inconveniente. La rapida aparicion de adhesividad en lascolas animales cuando solidifican en forma de gel las hace utiles en aplicaionestales como el pegado de tejido o madera, encuadernacio de libros, fabricacion decartonajes en maquinas de alta velocidad y en la fabricacion de papel engomado.
Anexo 1.PROPIEDADES DEL COLAGENO El papel del colágeno en el mantenimiento de laspropiedades físico-químicas y mecánicas de la dermis nos lleva a pensar quesu utilización cosmética podría paliar una situación deficitariafavoreciendo: A) Mantenimiento de la hidratación profunda El efecto hidratante del colágeno se atribuye a sucapacidad para retener agua. El colágeno nativo soluble utilizado aconcentraciones del 0,05%, tiene un poder hidratante comparable a un 10% de unagente humectante como la urea o el sorbitol. Este efecto puede evaluarse pordiferentes métodos: - Pérdida insensible del agua de la piel. - Medida de la impedancia eléctrica o térmica de la capa córnea. - Medida de las propiedades viscoelásticas del estrato córneo. B) Relieve cutáneo La aplicación del colágeno provoca un efecto de"alisamiento" de las estructuras superficiales cutáneas, que setraduce por una mayor suavidad de la piel. La influencia del colágenosobre la topografía cutánea se ejerce a dos niveles: - Cuando el estado de la piel se ve alterado por causa de untratamiento químico o por malas condiciones climáticas, el colágenoposee la facultad de restaurar la organización inicial de la superficie. - Sobre una piel sana, la aplicación del colágenocomporta una reducción de las amplitudes del relieve cutáneo sin modificar sucomplejidad. En el caso del colágeno fibroso (liofilizado)utilizado como máscara facial, el efecto de "alisado" es visible conuna sola aplicación. Esta propiedad se debe a la presencia de colágenosoluble. Esta actividad sobre el relieve cutáneo es el reflejo de laspropiedades hidratantes y filmógenas del colá- geno. C) Elasticidad cutánea Las propiedades mecánicas de la piel están definidas en términosde solidez, extensibilidad, rigidez o elasticidad. En el estudio de lainfluencia de un tratamiento cosmético con colágeno soluble se determinóque éste comportaba una disminución del valor de la fuerza de rotura ymejoraba la elasticidad. D) Estimulación del crecimiento celular En cultivos celulares se ha determinado que los substratos decolágeno permiten mantener células vivas. Las cadenas a del colágenoposeen propiedades quimiotácticas sobre los fibroblastos, lo cual permiteexplicar en parte su papel en la cicatrización. E) Poder anti-irritante El colágeno bajo la forma soluble o fibrosa posee elpoder de reducir la irritación inducida por agentes químicos, cuando se aplicaal mismo tiempo que éstos. Este efecto protector se ha estudiado con respectoal aceite de crotón y en varios detergentes. En este caso, parece que el colágenoforma un film alrededor de las micelas del detergente y modera con ello, la acciónde estos productos. Este efecto protector puede ser también explicado por unmecanismo de protección por absorción del colágeno sobre la superficieexterna del estrato córneo. La influencia de un tratamiento cosmético con colágenoen el proceso de envejecimiento se ha evaluado con dos técnicas: 1) Estudio de la estabilidad térmica de la red del colágeno: La desnaturalización del colágeno, es decir su pasode estructura ordenada helicoidal a estructura amorfa tipo gelatina se puedemedir por un calorímetro diferencial programado. En efecto, esta transiciónprovoca una reacción endotérmica que se traduce en un pico de absorción decalor, pues la superficie es proporcional a la entalpia de desnaturalizacióndel colágeno. Con el fin de juzgar la influencia de un tratamiento cosméticocon colágeno nativo, Flandín y cols, aplicaron una emulsión O/W con0,02% de colágeno en rata en periodo de crecimiento, observando unamodificación de las propiedades térmicas de la red colagénica, apareciendocomo "más joven". 2) Estudio de las propiedades biomecánicas de la piel: Teniendo en cuenta que la red fibrosa y en particular lasfibras de colágeno son el elemento de la piel más importante desde elpunto de vista mecánico, Flandín y Herbage midieron diferentes parámetros(elasticidad, ruptura,...) en piel de ratas aplicándoles una emulción O/W con0,02% de colágeno ácido soluble frente a una emulsión placebo. Despuésdel sacrificio del animal, se sometieron las muestras de piel a la tracción deun dinamómetro Introom 1026, hasta su ruptura. Se obtuvo una disminuciónsignificativa en la fuerza de rotura y en la estabilidad. En conclusión, parece que en pieles jóvenes, el colágenofrena la evolución de los parámetros físico-mecánicos y retarda así, elenvejecimiento de la red fibrosa.
USO COSMETICO DEL COLAGENO Actividad sobre la dermis El colágeno aparece como un excelente factor dehidratación, un agente susceptible de favorecer la suavidad y la elasticidadcutánea, también susceptible de enlentecer la evolución de la edad de los parámetrosfísicos de la demis, de activar la regeneración tisular y reducir lasirritaciones cutáneas. Así pues, los colágenos ácido-solubles, con o sintelopéptidos, se emplean en preparación de leches y cremas de tratamiento. Loscolágenos liofilizados, se utilizan como máscaras faciales para el mismo fin.
Actividad sobre los cabellos El colágeno y sus hidrolizados se introducen enproductos capilares como agentes acondicionadores y protectores. El colágenofavorece la cohesión de las escamas de la cutícula. Este efecto se traduce poruna modificación de la porosidad del cabello así como una mejora de su estadosuperficial. Por otra parte, el cabello tratado con colágenonativo soluble puede elongarse en un 6% superior a un cabello no tratado. Actividad como vehículo El colágeno ocupa un lugar privilegiado comobiomaterial, al poseer la capacidad de reticularse obteniendo matrices colagénicascon grado de solubilidad variable. J. Cotte y H. Dumas, aplican la técnica dePrilling para conseguir microesferas que aprisionan activos insolubles o lipófilosy que dependiendo del grado de reticulación pueden fundirse y romperse alaplicarlas sobre la piel cediendo dichas sustancias. También se consiguenesferas resistentes para su uso en peelings.
USO MEDICO DEL COLAGENO La utilización del colágeno para realizar el catgut,fue el primer paso de este material en la utilización médica. Entre 1932 y1944 aparecieron los trabajos de T. Huzella, sobre el crecimiento de célulassobre fibras de colágeno. En 1956 R.L. Ehrmam y G.O. Gey publicaron"The growth of cells on a transparent gel of reconstituted rat-tailcollagen" y muestran la acción favorable del colágeno en elcrecimiento de 29 tipos de células y de implantes tisulares (hombre, rata,rana). Después de él, numerosos investigadores siguieron los estudiosconfirmando los resultados obtenidos por otros autores, mostrando que el colágenoaumenta el crecimiento celular. A raíz de estos ensayos farmacológicos seiniciaron estudios en el campo de la cicatrización. A. Cier, demostró que el colágenodetermina una aceleración notable del proceso cicatricial. Nagelschmidt yStruck concluyeron que las heridas cortantes y fracturas se regeneraban de forma más rápida con la aplicación del colágeno exógeno.Más recientemente, Daniel, Foix y Zaegel, realizaron un trabajo remarcablesobre una muestra de 20 personas aquejadas de úlceras varicosas, obteniendo unarápida cicatrización en 16 casos, tras la aplicación, previa desinfección,de un film de colágeno. Es importante destacar la rapidez de cicatrización(de 8 días a 2 meses), en úlceras de un mes a varios años de desarrollo dondelos cicatrizantes habituales (ácido acexámico y triclorocarbanilida),aportaron una muy débil mejoría o nula. La utilización del colágenoen el ámbito médico se fundamenta con las propiedades siguientes: -Contribución a la mejora de las propiedades mecánicastisulares. - Poder hemostático: las placas y los polvos de colágeno seutilizan en cirugía para provocar la hemostasia. - Crecimiento celular: los soportes de colágeno seutilizan como sustrato para desarrollar cultivos celulares. Estos cultivospueden conducir hacia la formación de nuevos tejidos. - Coadyuvante de la cicatrización: el colágeno bajola forma de film, se utiliza en el tratamiento de quemaduras y úlceras. Esbiocompatible y biodegradable. En comparación con otras proteínas es algoinmunógenos y los telopéptidos del colágeno humano son prácticamentesuperponibles a los de colágeno bovino. Es esencial que la antigenicidadse evalúe de forma independiente para cada tipo de producto. Los determinantesantigénicos principales están localizados a nivel de los telopéptidos. Esimportante destacar que el colágeno desnaturalizado es más antigénico,de ahí la importancia de utilizar colágeno nativo para las aplicacionesmédicas. La biodegrabilidad del colágeno y sus derivados es un puntoimportante en su utilización en el campo de los implantes. En los implantes, elnúmero de "Crosslink" es un factor importante en la revascularización,regeneración celular y en la persistencia del implante. El colágeno puede implantarse en heridas con pérdidade piel con el fin de impedir la retracción y de minimizar el desarrollo deltejido de granulación. En el año 1981 la F.A.D. aprobó la introducción del colágenoen el mercado. Se precisa antes de su uso, realizar una prueba de sensibilizaciónen el antebrazo para asegurar la alergia del enfermo hacia este material, y noproceder a su implantación hasta haber observado la zona durante un periodo decuatro semanas. El colágeno inyectado subcutáneamente se condensa enuna masa blanda y coherente por contacto con la temperatura del organismo.Generalmente se emplea como reemplazo o relleno para la corrección de ciertosdefectos en la dermis. Las indicaciones más comunes para su uso son:
- Arrugas frontales profundas. - Surcos glabelares y genolabiales acentuados. - Arrugas peribucales. Las placas de colágeno obtenidas por liofilizaciónde un gel de colágeno nativo se utilizan como: - Rápido hemostático. - Fuerte epitelizante. - Favorecedor de la fijación y adhesividad de injertos ycolgajos. - Pueden usarse como implante de colágeno en bebidas,en una solución fisiológica tamponada con fosfato y lidocaína. - Corrección de líneas de risc, glabelares, o verticalesdel entrecejo, comisuras surco nasogeniano, mentonianas, etc., y en cicatricesacneicas o por traumas.
La esponja de colágeno sirve temporalmente de matrizpara las células que forman un tejido de colágeno utilizándose como substratopara el depósito mineral y la formación ósea. Las esponjas de colágenose emplean también como reservorios de medicamentos o en contraceptivosvaginales. Los hilos de colágeno curtido se utilizan como suturaen cirugía. Los tubos de colágeno se emplean como reservorios demedicamentos implantes. Después de esta breve revisión del colágenopodemos concluir destacando que este biomaterial a pesar de ser conocido desdehace bastantes años sigue formando parte activa en formulaciones de alta cosméticasiendo poco afectado por las modas que este mercado sufre habitualmente. Estonos indica que su efectividad y propiedades no son fáciles de sustituir; peroquizá es, en el mundo de la dermatología y cirugía donde nos sorprende conunas cualidades excepcionales y dignas de atención.
Anexo 2.aspectos básicos sobre adhesivos Adhesivo: Es un material capaz de mantener unidos dos materiales sólidosproporcionando la fuerza de atracción física necesaria entre las dossuperficies. El material al cual se adhiere el adhesivo se denomina sustrato o adherente. Composicion : La naturaleza exacta de las composiciones no es difundida porlos fabricantes, pero la siguiente composición es típica de muchos adhesivos: a) Polímero: Forma la masa del adhesivo y contribuye a su resistencia en las3 dimensiones. b) SOLVENTE: debe estar presente para llevar el adhesivo al estado líquido. c) CARGAS: Se agregan para reducir costos o mejorar ciertas propiedades comola fluidez o la resistencia al despegue. d) ADHESIVADORES: Sustancias que contribuyen al pegado mientras el adhesivoestá todavía húmedo o sin curar. e) PLASTIFICANTES: Ablandan la película final del adhesivo e impartenflexibilidad. f) ADITIVOS VARIOS : Como, retardadores de inflamación, estabilizadores deluz, colorantes y los agentes de control de viscosidad, son los casos más típicos. MOLECULAS ADHESIVAS : Los adhesivos comerciales son una mezcla compleja demoléculas a causa de los compuestos que se le agregan (COMPONENTES) . Las moléculasviscosas que atraen y realmente tienen las sup. unidas son polímeros orgánicos.Las moléculas de éstos (polimeros) contienen carbono e hidrógeno y tambiénátomos de oxígeno, nitrógeno, silicio, cloro, etc.
Los átomos de una molécula adhesiva pueden estar unidos de diferentesmaneras, pero la mayoría tienen en común las sig. características : 1. átomos ligados por electrones compartidos, ésto es una unión covalente; y entonces el adhesivo tiene limitada estabilidad al calentamiento yusualmente no son hidrosolubles (hay muy pocos) un caso típico son las colasvinílicas. 2. son polímeros, moléculas muy extensas, conteniendo miles de átomos. Lasmoléculas de los adhesivos pueden tener un ordenamiento lineal de átomos opueden ser polímeros ramificados. Los electrones compartidos son libres de moverse entre los átomos que losunen y se suspenden en este volumen por la atracción que el núcleo atómicopositivo ejerce sobre ellos. Como las moléculas están cargadas electrónicamentelos adhesivos se adhieren a las superficies y a sí mismo. La constantefluctuación de centros positivos y negativos en una molécula indica que lacarga neta en la molécula es cero. Habrá siempre atracción entre moléculas,sin embargo, internamente cargas desiguales pueden alinearse en las cercaníasde las moléculas ; la atracción resultante de esta distribución despareja deelectrones es llamada fuerza de Van der Waals. Estas fuerzas se aplican tanto alas superficies adherentes (fuerzas de adhesión) como a las moléculasadyacentes (fuerzas de cohesión). El rango de éstas fuerzas esconsiderablemente más bajo si el material adhesivo no está en contacto íntimocon las zonas a unir, debido a la rugosidad superficial de las sup. tratadas mecánicamenteque siempre existe. Este es el motivo por el que el adhesivo ha de penetrartotalmente en la rugosidad superficial y mojar toda la superficie. Laresistencia de la fuerza adhesiva depende, por esta causa, del grado de mojado(para lograr el máximo intercambio intermolecular) y, por otro lado de lacapacidad adhesiva de la superficie. Mojabilidad (o humectación): El término se refiere al recubrimiento deadhesivo en íntimo contacto con la superficie. Al fluir el adhesivo y encontrarun valle éste fluirá dentro del valle (buen mojado) o hará un puente sobre éste(mal mojado). Los adhesivos que tienen altas fuerzas atractivas para sí mismos,serán mas viscosos y tienden a formar puente sobre los valles teniéndose comoresultado una menor área de contacto entre el adhesivo y el sustrato, reduciéndosela resistencia del pegado. Un problema especial se presenta cuando el adhesivo es aplicado disuelto ensolvente ; el solvente puede fluir dentro de la sup. del valle mas rapidamenteque el adhesivo, por lo cual resulta que el adhesivo se mantiene flotando sobrela capa de solvente. Cuando el adhesivo es curado el solvente se pierde porevaporación y produce un vacío entre el adhesivo y el sustrato. Los procesos de limpieza se pueden evaluar con el "ensayo de rotura degotas de agua" : al aplicar varias gotas de agua sobre una sup. limpiada deforma inadecuada, la forma esférica de la gota se mantiene bastante, pero si elagua se extiende, el mojado es satisfactorio (la cara de unión estásuficientemente limpia). Sin embargo la variación en la dureza del agua afecta a la tensiónsuperficial y entonces no se obtienen ensayos confiables. Para estos casos hay líquidoscomparables disponibles con tensiones superficiales definidas.
CONDICIONES GENERALES PARA UNA BUENA ADHESIÓN · El adhesivo en estado liquido debe tener menos tensión superficial que elsustrato. · El sustrato debe ser suficientemente rugoso, las asperezas superficialesdeben ser del orden del micrómetro. · La viscosidad y condiciones de aplicación del adhesivo deberían sertales que las asperezas del sustrato sean mojadas completamente. · Si se espera un medio agresivo, debe garantizarse la capacidad de enlacescovalentes ya que estos contribuyen a la estabilidad de los átomos combinados. CLASIFICACION : Según Rquerimientos de uso : Adhesivos Estructurales : aquellos que deben soportar una carga mayor que elpeso del adherente. Ej. : secciones de las alas de aviones, partes de carroceríasbásicas de automotores. Adhesivos de sostén : deben soportar solamente el peso de los adherentes.Ej. : adhesivos para azulejos, etc. Adhesivos selladores : prevenir el pasaje de fluidos a travéz de una junta.Ej. : selladores para juntas de carrocerías, para parabrisas, etc. Según Estabilidad al calor : Adhesivos termoplasticos : aquellos que se ablandan y fluyen cuando soncalentados, y solidifican al enfriarse. Adhesivos termoendurecibles : no se ablandan cuando son calentados, puedencarbonizarse si son calentados a temperaturas elevadas pero no fluyen. Según la Composición Química : Fuentes animales : incluyen varios tipos de colas (de proteínas animales :utilizadas por muchísimo tiempo para el encolado de objetos de madera,obtenidas de cueros y huesos) y colas de caseína (proteínas de la leche : prácticamenteinsolubles en agua, se usan en el pegado de paquetes de cigarrillos y cintas depapel, etiquetas resistentes a la humedad e industria del embalaje.) Fuentes vegetales : incluyen los adhesivos basados en almidones (hidratos decarbono : con agua caliente forma el engrudo) o dextrina (despolimerización delalmidón): el maíz es la mayor fuente de adhesivos a base de hidratos decarbono, utilizados en la manufactura de cartones corrugados, acanalados y otrosproductos del papel, tienen pobre cohesividad y pobre resistencia al agua. Tambiénlas gomas naturales y los adhesivos asfálticos. Sintéticos : basados en materiales desarrollados por la industria química. Según los Métodos de curado : Por solidificación (selladores base cera o parafina) Por evaporación de solvente (cementos base goma y las colas blancas) Por reacción química : Siendo más fuertes que la mayoría de los adhesivos modernos, las colasanimales se siguen usando en la restauración de madera y carpinteríatradicional, así como en algunas técnicas pictóricas. Una vez engrosadas enagua y calentadas al baño-maría, se usan en caliente, y gelifican alenfriarse. En carpintería, su solubilidad en agua las hace reversibles,permitiendo así mismo la rectificación del encolado. En pintura, se usan tantocomo imprimación de lienzos y tablas como en la elaboración de pinturas altemple; y, por supuesto en las técnicas tradicionales de dorado a la cola. Las colas animales se distinguen por sus diferentes grados de adhesividad yelasticidad, pero, en todo caso, se debe tender a preparar coladas con la mínimaconcentración requerida, con el fin de evitar riesgos de tracción o tensionesen los materiales encolados. Como ejemplo, 40 g de cola de conejo en un litro deagua son suficientes para preparar una imprimación de lienzo y 60 g en un litrode agua para preparar una pintura al temple; para el agua de cola en el doradoal agua se suelen utilizar 70 g por litro. Para encolado de piezas de madera,sin embargo, se recomienda engrosar cola fuerte o cola de cartílagos en agua, yluego añadir más agua mientras se calienta, hasta que la solución se escurrade forma suelta por una cuchara de madera. Los adhesivos o pegamentos son aquellas sustancias capaces de unir otrassustancias por contacto superficial. Se pueden clasificar según los tipos en:adhesivos inorgánicos y adhesivos orgánicos; dentro de estos últimos estánlos naturales y los sintéticos. La cola fría es un adhesivo de tipo orgánico, sintético; específicamentees una emulsión líquida de aspecto lácteo que tiene en suspensión pequeñísimaspartículas de sustancias aceitosas o resinosas de polivinil acetato o polivinilacrilato (pva) más aditivos que sirven para darle ciertas característicasespeciales, tales como: adhesividad, tiempo de abierto, tiempo de secado, color,olor y pH (grado de acidez). Los aditivos que se utilizan son muy variados ydependen de las características específicas del producto, pero, en general,los más usados son: plastificantes, colorantes, soluciones tipo buffer,resinas, etc.
Pegamentos en general La mayoría de los pegamentos posibilitan la unión al rellenar los huecos yfisuras diminutos que existen normalmente en cualquier superficie, aunque seamuy lisa. Los pegamentos son económicos, distribuyen la tensión en el punto deunión, resisten a la humedad y a la corrosión y eliminan la necesidad deremaches y tornillos. Su eficacia depende de varios factores, como la resistencia al encogimiento ydesprendimiento, la maleabilidad, la fuerza adhesiva y la tensión superficial,que determinan el grado de penetración del pegamento en las minúsculasdepresiones de las superficies a unir. Los pegamentos varían según el propósitocon el que se vayan a utilizar. En la actualidad, estos objetivos incluyen eluso creciente de pegamentos en cirugía y odontología. Los pegamentos naturales han sido sustituidos en muchas aplicaciones por lossintéticos, pero aún se siguen utilizando en grandes cantidades almidones,gomas, celulosa, betunes y cementos de goma naturales. Entre los adhesivos orgánicos derivados de proteínas naturales seencuentran las colas (sustancias sólidas pegajosas) hechas de colágeno, uncomponente de los huesos y tejidos conectivos de los mamíferos y peces; la colade la albúmina de la sangre, que se usa en la industria de la chapa de madera,y una cola hecha de caseína, una proteína de la leche, que se emplea parapegar madera y en la pintura. Entre los pegamentos vegetales se encuentra los almidones y las dextrinasderivadas de maíz, trigo, patatas (papas) y arroz, que se utilizan para pegarpapel, madera y tejidos; ciertas gomas como la goma arábiga, el agar y laalgina, que cuando están húmedas proporcionan adhesión a ciertos productoscomo los sellos o timbres y los sobres engomados; los pegamentos de celulosa,empleados para pegar pieles, tela y papel; los cementos de goma, y las resinascomo el alquitrán y la masilla. Los pegamentos sintéticos, ya se utilicen solos o como modificantes de lospegamentos naturales, tienen mejor rendimiento y una gama de aplicación másamplia que los productos naturales. La mayoría de ellos contienen polímeros,que son moléculas enormes formadas por un gran número de moléculas simplesque forman cadenas y redes fuertes enlazando las superficies en una uniónfirme. Los pegamentos termoestables, que se transforman en sólidos duros yresistentes al calor por la adición de un catalizador o la aplicación decalor, se usan para pegar piezas metálicas de aviones y vehículos espaciales.Las resinas termoplásticas, que pueden ablandarse con el calor, se usan parapegar madera, vidrio, caucho o hule, metal y productos de papel. Los pegamentoselastoméricos, como los cementos de goma naturales o sintéticos, se utilizanpara pegar materiales flexibles a materiales rígidos.
Tipos de pegamento
Adhesivos húmedos Los adhesivos húmedos sólo se aplican a una de las piezas a ser unidas einmediatamente ésta es pegada a la segunda pieza. Las piezas deben ser fijadas,ya que la adherencia se produce tan solo una vez que los solventes se hanevaporado. En el caso de los así denominados pegamentos libres de solventes, lasustancia portadora es el agua. Los materiales de poros abiertos favorecen elsecado de los adhesivos húmedos.
Pegamentos de contacto Los pegamentos de contacto se aplican en ambas piezas de unión. Después deltiempo de secado, que puede variar conforme a cada solvente, las piezas sonjuntadas ejerciendo una fuerte presión de apriete. Las piezas quedaninmediatamente unidas y la pieza de trabajo puede ser rápidamente sometida aesfuerzos.
Adhesivos reactivos Los adhesivos reactivos son pegamentos que endurecen por reacción de tipo química,física o catalítica. De acuerdo con el tipo de reacción, pueden constar deuno o dos componentes. Adhesivos reactivos de un componente Los adhesivos monocomponentes son pegamentos que, según el tipo, reaccionanpor la humedad del ambiente, los rayos ultravioletas o el oxígeno atmosférico(pegamentos aeróbicos), o bien, en ausencia de aire, por ejemplo, por iones metálicos(pegamentos anaeróbicos). En el caso de pegamentos monocomponentes, elpegamento es aplicado de un solo lado de la juntura. La reacción comienzainmediatamente al entrar en contacto con el segundo componente activo presenteen el ambiente o sobre la superficie de pegado. Adhesivos reactivos de dos componentes Los pegamentos de dos componentes son adhesivos que, según el tipo,consisten de componentes líquidos, pastosos o en polvo. Por regla general, loscomponentes deben mezclarse exactamente en la relación de mezcla indicada. Parasu uso sólo queda disponible un período de tiempo limitado (tiempo de estado líquido).El curado comienza inmediatamente. El tiempo de curado depende asimismo del tipode pegamento y de la temperatura del ambiente. El pegado debe ser fijado hastaque se haya endurecido por completo.
Pegamento termofusible Los pegamentos termofusibles pueden aplicarse en forma de cartuchos, barra,en polvo, granulado, red o película. No contienen solventes. Por lo general nose requieren procesos de mezclado o dosificación. Los pegamentos termofusibles se funden por calor. Esto puede ocurrir en la misma juntura (por ejemplo, planchado de tirasencoladas) o por medio de una pistola encoladora por la cual el pegamentocaliente es aplicado sobre las piezas a ser unidas. Los termoadherentes se funden a temperaturas de entre 110°C (UHU Pistole LT110) y superiores a 220° C (en otros sistemas).
Autoadhesivos Los autoadhesivos son productos que conservan permanentemente su poderadhesivo. Estos materiales de poder adhesivo permanente se aplican allí dondeno se pretenda un pegado de larga duración, sino más adelante se desee volvera despegar. Los autoadhesivos encuentran su aplicación esencialmente en cintasy bandas adhesivas, en bandas y almohadillas autoadhesivas de dos caras, asícomo en notas, etiquetas y hojas plásticas autoadhesivas. Fuente Internet:
Cola Caliente: producción masiva que involucran accesorios metálicos depende de lasuniones mecánicas. Hace como 50 años los únicos adhesivos de importancia comercial eranaquellos que se obtenían de los animales, u otros productos naturales cuyo usodata de siglos. Actualmente y desde 1900 los pegamentos procedentes de plantas yárboles han encontrado una amplia gama de usos, especialmente sobre materialesporosos como el papel. Los adhesivos de "Casein" fueron ampliamenteusados en La Primera Guerra Mundial para aeroplanos militares, aunque sedescubrió que tenían una resistencia limitada en ambientes húmedos y porefecto del crecimiento de hongos. El progresivo y rápido aumento en el uso delos adhesivos en la industria se debió principalmente al desarrollo de resinassintética las cuales no tienen las limitaciones de los productos naturales y cuyo beneficio adicional es quepuede generar uniones entre metales y otros materiales carentes de porosidad. Laprimera resina sintética de gran importancia fue el "PhenolFormaldhyde" que fue ampliamente usado para unir placas de estaño uhojalata. La segunda guerra mundial vio el desarrollo de resinas epoxicas parala unión de estructuras metálicas en aeronaves, y desde aquella épocanumerosos tipos de resinas sintéticas y gomas han sido desarrolladas. Lasuniones por medio de adhesivos son consideradas de gran importancia para la uniónde metales y una amplia gama de materiales y se usan para un sin numero de propósitos.Este incremento en el uso de adhesivos ha tomado lugar en aplicaciones noestructurales tales como la ingeniería general de productos, como la de loscalzados y la industria de empaquetamiento. (Adhesivos naturales, Resinasepoxicas, Adhesivos solventes, Adhesivos Celulosicos, Debido a sus ventajas enun sin numero de aplicaciones, los pegamentos o adhesivos ofrecen nuevasposibilidades de construcciones a bajo costo. Estos se deben considerar como un método complementario para otros métodosde unión, y pueden ser usados en condiciones de necesidad y beneficio para lossectores económicos marginados. Por ejemplo el peso de un producto es de vitalimportancia para un diseñador de productos y fácilmente podrá afectar elcosto del mismo, por lo que el uso de adhesivos complementados al uso detornillos y clavos reduce significativamente el tamaño y cantidad de losmismos, reduciendo a su ves el peso del producto. En la actualidad las guías de diseño ingenieril buscan familiarizar al diseñador con una variedad de aplicaciones sobre el uso de materialesadhesivos y procesos de unión, manteniendo en mente que su efectividad va de lamano con el conocimiento sobre sus ventajas y limitaciones e involucra conceptosnuevos sobre diseño y producción.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LAS UNIONES CON ADHESIVOS: Beneficios obtenidos por el uso de adhesivos Dependiendo del tipo de adhesivo que se use, el diseño de las uniones, el métodode aplicación y la función que se desea cumplir, las uniones con adhesivos seráncapaces de ofrecer las siguientes ventajas: * La habilidad de unir una amplia gama de materiales, cuyas cualidades podrándiferenciarse en composición, coeficientes de deformación y expansión, modulode elasticidad, espesor, etc. * La eliminación de aquellas superficies irregulares y contornos de superficie generados por los métodos de unión como los tornillos y clavos, ofreciendo una mejor apariencia de acabado en el proceso de ensamblaje. * La fabricación de formas complejas donde métodos convencionales de unión no son aplicables * Una distribución mas uniforme de los esfuerzos sobre el área de aplicación del adhesivo, con la minimización de áreas de stress concentrado como las generadas por los tornillos y clavos. Con frecuencia se podrán usar materiales más delgados sin la perdida de resistencia, ahorrando peso y costo. * Una significativa reducción de peso por medio de la eliminación de accesorios metálicos como pernos, tornillos y clavos * La posibilidad de unir materiales sensibles al calor, generando las uniones con adhesivos por medio de presión. * La ventaja que ofrecen las propiedades de sellamiento e aislación de las uniones por medio de adhesivos contra la humedad y los químicos. Lascapas de adhesivo pueden actuar como aislantes frente a la electricidad, elcalor, el sonido y más aún pueden reducir o prevenir la corrosión porgalvanización entre metales que son similares. * La reducción de los costos de producción en los procesos de manufacturación y ensamblaje, por medio de la reducción de los requerimientos de los materiales, reducción del peso y la eliminación deotras operaciones tales como las perforaciones con taladro, para el caso de lostornillo, la eliminación del martilleo, en el caso de los clavos, etc. * La perseverancia de servicio de las uniones con adhesivos en el tiempo esdesconocida en condiciones atmosféricas severas. El calor, la radiación, losagentes químicos y el bio-deterioro pueden causar la destrucción del adhesivo.
MATERIALES ADHESIVOS Y SUS PROPIEDADES Los adhesivos se pueden clasificar en muchas maneras, considerando que cadadistinto tipo de formula puede ser definida en términos de: A.- Los materiales a ser unidos. B.- La forma física del adhesivo. C.- Los métodos de adherencia. D.- Las propiedades mecánicas ejercidas en la unión. E.- Su durabilidad en servicio. También podrán ser clasificadas en términos de los principales componentes químicos que la conforman y aún cuando esta es la clasificación que menos información entrega al diseñador, es comúnmente la mas usada. Materiales unidos La clasificación de los adhesivos de acuerdo a la gama de materiales que soncapaces de unir no es aplicable en su totalidad a los plásticos y gomas debidoa las variaciones en las propiedades de adherencia que se pueden encontrardentro de miembros específicos en cada clase; por ejemplo, un adhesivo que esadecuado para el cobre no es necesariamente adecuado para le acero. Las tablasque incluyen en su listas materiales distintos o similares adheridos conadhesivos recomendados definidos por su composición química, tienen un valor outilidad restringida y pueden ser engañosas.
Forma física La materiales adhesivos se encuentran disponibles en una amplia gama deformas físicas, y para un tipo particular de aplicación las opciones odecisiones están principalmente dictadas por consideraciones de ensamblaje,costo de diseño y las capacidades de la industria que la manufactura. Losadhesivos de película/lámina de una pieza son un de reciente desarrollo, cuyouso a ido incrementándose en la construcción estructural. Este tipo deadhesivo se encuentra disponible en ya sea en la forma de un material sensible ala presión o uno que depende de solventes o calor para liquidificar el materialde modo de provocar adherencia. En la practica de las labores de construcciónestructural, la combinación de los métodos de calor y presión para el secadoson generalmente requeridos. En general, los adhesivos de película/láminaproducen uniformidad en el espesor y distribución de adherente en la zona deunión, restringiendo la misma a un área especifica y asignada.
Líquidos de alta y baja densidad. La mayoría de las formulas que existen en este estado, son o dispersionessolventes o colocaciones acuosas. Estos son simples de aplicar con la posibilidad de tener un control de viscosidad por el usuario.
Pastas o Almácigo El material en esta forma es apropiado para aplicaciones de producción en masa donde son necesarios llenados de vacío ycaracterísticas de hundimiento. Una amplia variedad de consistencias son obtenibles de este material.
Película/Lámina Este material esta restringido en uso a superficieslisas y uniformes y se caracterizan por su fácil y rápida aplicación baja endesperdicio como también en el uniforme espesor y distribución de adhesivo.
Polvo El material en esta forma requiere ser mezclado con líquidos ose les debe aplicar calor para permitir que el polvo alcance su estado liquido. Algunos tipos contienen catalizadores latentes que son activos durante elproceso de secamiento a altas temperaturas. En general, los polvos son formas económicas de adhesivos, con una amplia vida útil.
Gránulos, cetros, cubos, Y otras formas sólidas. Estas son formas convenientes para fácil aplicación y secamiento parafunciones particulares. Los tipos sólidos son las bases para varas de soldadura adhesiva y materiales de fundición en calor. Esteadhesivo tiene una amplia vida útil. Requerimientos de secado: Los adhesivos se los puede clasificar en tres grupos principales, dichaclasificación se realiza en base a sus propiedades de secamiento yasentamiento.
BIBLIOGRAFIA 1. Borsntein P, Sage H. Structurally distinct collagen types.Ann Rev Biochem 1980; : 957-1003. 2. Gay S, Miller EJ. What is collagen, what is not.Ultractural Pathology 1983; 4: 365-377. 3. Martin GR, Timpl R, Muller PK, Kuhn K. The geneticallydistinct collagens Trends Biochem Sci 1985; 10: 285-287. 4. Bourdariat B. Rêpercussión d'une carente en zincauniveau de la proliferation cellulaire et de la biosynthese du collagène surfibroblastes cutanes humains en cultu- re. Thèse de Doctorat en phasmacie. Grenoble I, 1985. 5. Chung, Miller. Collagen polymorphism Sciencies 1974;83:1200-1201. 6. Elstow SF, Weiss JB. Extraction, isolation andcharacterization of neutral salt soluble type V collagen from fetal calf skin.Collagen Pel Res 1983; 3: 181-183. ACTUALIDAD DERMATOLÓGICA - 191 7. Rich A, Crick FCH. Nature Lond 1955; 176: 915916. 8. Beyssac 1. Alcohol, glycosaminoglycans, collagen:NewCosmetic applications. In: Bulletin technique Gattefosse 1984; 77: 77-87. 9. Leurquin-Thomas G. Elaboration d'implants á base decollagène: Applications dentaires. Thése doctorat. Lyon, 1986. 10. Seltzer JL, Jeffrey JJ J, Eisen AZ. Evidence for mammalian collagenases as zinc ion metalloenzymes. Biochim Biophys Acta 1977; 485: 179-187. ll. Light, Balley. Molecular Structure and Stabilization ofthe collagen fibre in Biology of Collagen. Viidik A and Vuust J, Eds., AcademicPress. London, 1980; 15. 12. Dumas H, Tardy M, Tayo JL, Rochat HH, Verain A. Techniquedu prilling adaptée á des Solutions de Collagène. 5." CongresInternational de Technologie Pharmaceutique, juin 1989. Paris. 13. Richter K. Collagenè information Bulletin nº 328 CLRBerlin. 14. Nagelschmidt M, Struck H. Arch Dermatologie Forsch 1974;250: 236-243. 15. Chapveil M. Industrial uses of collagene - Infundamen-tals aspects of biocompatibility. Part 1. Principies of corrosion anddegradation of biomaterials. Willians DF Editions C.R.I. Press. 16. Huc A, Hartmann D, Joumot M, Compte PH, Villet G. Etudede la penetration in vivo dans la peau de rat du collagène acido-soluble ensolution acide ou en melange dans une creme cosmétique. Int Journal of Cosmet Sciences 3,1981; pp 159-183. 17. Flandin F, Masmejean M, Buffevant C. Romeu M. Etu- de dela stabilité thermique du réseau collagène de la peau par calorimetriedifferentielle. Influence d'un trai- tement cosmétique. Int Journal of Cosmetic Science 6, 1984;pp 115-121. 18. Flandin F, Herbage D. Données générales sur lacomposition et les propriétés mécaniques de la peau. Bulletin TechniqueGatteffosse n.º 71, 1978; pp 51-58. 19. Clar EJ, Her CP, Struelle CG. Skin impedance andmoisturization in effectiveness of cosmetics. Comptes rendus du CongrèsIntemational Federation of Scientific and Cosmetics Chemist. 1974, London. 20. Corcuff, Chatenay, Brun. Evolution of antiwrinkle effectson humans. International Journal of Cosmetics Sciences 1985; 7: 117-126. 21. Garber, Nightingale. Characteristic cosmetic effects andskin morphology by scanning electron microscopy. I OfSoc Cosmetic Chem 1976; 27:509-531. 22. Hoppe, Savermann. Quantitative analysis of the skin'ssurface by means of digital signa1 processing. J Soc Cosm Chem 1985; 36:105-123. 23. Paviot, Beyssac. Properties and structure of Lyophilizedfibrous collagen. Travaux présentés au congrè intema- tional de 1'IFSCC.Barcelone, 1986. 24. Daniel, Foix. Le collagène: Approche physiologique de lacicatritation cutanée, son application dans le traite- ment practique dels ulcéresde jambes. Le semaine des hospitaux de Paris 1979; 54: 833-838. 25. Guillot, Martini y cols. Anti-irritant potential ofcosme- tic raw materials and formulations. Int Journal of Cosm Sci 1983; 5:255-265. 26. Morganti, Muscarini, Fabrizi. Protective effect uponirritation response of detergents. Int Journal of Cosmetics Sci 1983; 5: 7-14. 27. Orset. Activity of collagen on the hair mechanicalproperties 1978. Rapport de Stage. Document Gattefosse. 28. Chvapil. In: "Biology of collagens", Wiidinck,Vuust.ed. Academic Press, London, 1980; 313-324. 29. Olivier. Collagen as a dermal implant in"Biocompatibi- lity of tissues analogs 1" William DF ed. CRC Press, Florida, 1985; 117-134. 30. Pourus Collagen Sponge: Wound Dressings in vivo andinvitro studies. Charles J Doillon, MD. University of Medicine and Dentistry NewJersey. Journal of Bioma-terials Aplications Volume 2, April 1988. 31. Reconstitution de tissus a partir de collagene et descellules differencies. J Frey et col. Centre Hospitalier etUniversitaire 42023Saint-Etienne. France, 32. Eugene Bel1 and col. The reconstitution of Living Skin.The Journal of Investigative Dermatology 1983; 81: 25-105, Vol. 81, n.O 1, Supl. 33. Cotte J, Dumas H. Le collagène et ses possibilitéstechnologiques. J Pharm Belg 1991; 46,3: 201-210. ARTICULOS BASE: ACTIFS ET ADDITIFS ENCOSMETOLOGIEChap 6 Le collegène. M.Dubois. LE COLLAGENE ET SES POSSIBILITES TECHNOLOGIQUESJ. Cotte, H.Dumas. J. Phorm Belg. 1991; 46,3: 201-210. LE COLLAGENE ET SES APPLICATIONS COSMETIQUES Entretiens deCarla. Juin 1986. Correspondencia: Noemí Serra Baldrich Avda. Diagonal, 460, 6.º A 08006 Barcelona 192 - ACTUALIDAD DERMATOLÓGICA http://www.uhu.de/_es/indexx.html?main=/_es/klebeberatung/klebelehre/arten.html 34.Bioquímica Agroindustrial de Blindell 35.Subproductos cárnicos. Editorial Acribia. Biblioteca DaríoEchandía) 36.Tecnología de los productos cárnicos (biblioteca DaríoEchandía) 37.Bioquímica de Harper. 38.www.cerba.com/docs/doc005.doc 39.www.mundomuseo.com.ar/gelatinas 41.Búsquedas por Google: "colágeno bioquímica","colágeno".
Autor: Arbey Orlando Vargas Tao
Articulos relacionados:
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
Copyright © 2011 ilustrados.com, Monografias, tesis, bibliografias, educacion. Tofos los temas y publicaciones son propiedad de sus respectivos autores ©